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、酒精发酵
二、与酿酒有关的微生物
第一章酿酒
第二节
酿酒的基本原理
2024/12/25
一、酒精发酵
1酒精发酵理论的发展历程:
最初有的学者认为发酵是一种纯的化学现象。例如:司当勒(stanl)在1640年提出,“酵母在发酵中的作用,只是将它的分解作用转导给液体中其它可发酵的部分”。李比西 (liebig)在1845年提出,“酵母的作用并不是由于它的生命活动,相反地恰恰是由于它的分解”。但是这些理论均未经过科学试验来证明。
后来,巴斯德通过试验证明了在糖液中加入少量的酵母,其中并没有其它含氮化合物,便可以引起糖液的发酵。在发酵过程中,酵母本身不仅不会破坏和分解,而且还会生长发育,在显微镜下观察时还是活的,因此,他得出结论:“酵母的生长发育是与发酵现象有密切关系的”。在此思想指导下,终于使他发展了酒精发酵的理论。
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克劳德白那尔(生物学家)认为酒精发酵是纯化学现象,其论点
是:酵母体内有一种酶,它能使糖变为乙醇和二氧化碳。这个论点
在1897年被毕士耐尔证实了,他从酵母的细胞内提取出了一种物质
(酶),能引起酒精发酵,他将这种酶称为酒酶。因此,他证明了
酒精发酵是一种化学现象。
巴斯德认为酒精发酵是生物学现象,他通过试验证明了发酵是酵
母细胞生命活动的结果,因此,发酵现象是由微生物引起的,这是巴斯德的最大贡献。
2024/12/25
综上所述,酒精发酵是生物和化学相结合的一种现象。即一方面生物体(酵母)是化学反应的所在地,在那里将糖分解为酒精和二氧化碳;另一方面这种化学现象必须有生物参加。
到十九世纪末叶,在微生物的研究得到进一步的发展,特别是对酶的研究开始后,才证实了这一点。从而知道酒是根据单糖类的酒精发酵这一原理制得。所以,酒精发酵是指酵母所分泌的各种酶,对于单糖所引起的生物化学变化。
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2实际应用
实际当中,酿酒所用的原料多数是淀粉质原料,但微生物不能直接利用淀粉发酵制得酒精,必须使淀粉经水解酶的作用分解为单糖后(即糖化),再经酒精发酵才能制取酒。这也就是利用淀粉质原料酿酒比水果酿酒工艺复杂的原因。
3化学原理
从生化角度看,是酵母在无氧条件下,将葡萄糖经HDP(EMP)途径降解为丙酮酸,丙酮酸经脱羧酶的作用分解为乙醛和二氧化碳,然后,在乙醛脱氢酶的作用下,还原成乙醇,这就是酒精发酵的原理,其过程见下图。
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磷酸甘油
甘油
EMP途
径
磷酸二羟基丙酮
NADH
NAD+
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苹果酸
乙酰CoA
异柠檬酸
延胡索酸
乙醛酸
NAD(P)
FADH₂4
琥珀酸CoA
CO₂
NAD(P)H+H*
α一酮戊二酸
()琥珀酰CoA7NAD
NADH+H*
ADP+Pi
(GDP)
GTP
ATP
乙酰CoA
草酰乙酸
三羧酸循
环
NADH+H*
一CoA
CoA
柠檬酸
丙酮酸
NAD*
CoACO₂
NADH+H
NADk
CO₂
FAD
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酒精发酵途径:
丙酮酸(厌氧)→活性丙酮酸→活性乙醛→乙醛→乙醇↓有氧
乙酰辅酶A→TCA循环→CO₂+H₂OCO₂
说明:上述各种反应中都需要特定的酶参与才能完成,具体这些酶在生化中都已经介绍过,在此不进行介绍。
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4发酵副产物的形成
(1)杂醇油的形成
杂醇油又称高级醇,以异戊醇为主,包括正丙醇、异丁醇、异戊醇、活性戊醇等。
生成途径主要有三条:
第一、由氨基酸脱氨、脱羧(去CO₂),生成比氨基酸少1个碳原子的高级醇,这是伊里氏(Ehrlich)于1905~1909年提出的,反应通式:
R—CH-COOH+H₂O→RCH₂OH+NH₃+CO₂
NH₃
第二、由糖代谢生成丙酮酸,丙酮酸与氨基酸作用,生成另一种氨基酸和另一种有机酸(α—酮酸),该有机酸脱羧变为醛,再还原成高级醇,例如:
丙酮酸+胱氨酸→酮基异已酸→异戊醛→异戊醇
第三、丙酮酸与乙酰辅酶A结合,由于碳链的增长,在蔗糖存在下,也可促进杂醇油的生成。
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(2)多元醇的形成
甘油的生成甘油主要产生在发酵的后期。
C₆H₁₂O₆→C₃H₅(OH)₃+CH₃CHO+CO₂
葡萄糖甘油乙醛
2、3-丁二醇的生成
第一,由双乙酰生成
CH₃COCHOHCH₃+AH₂--→CH₃CHOHCHOHCH₃+辅酶A
醋翁还原型辅酶A2,3-丁二醇
第二,由多粘菌及
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