仪器分析平面色谱法.pptVIP

薄层板制备*玻璃板的大小软板不加粘合剂硬板加粘合剂如5~15%石膏或0.25~0.75%CMC-Na010302点样*21配样溶剂的选择取决于待分析化合物的类型及其特性，相似相溶。合适的样品浓度应为0.01%~0.1%点样量影响展开后样品的形状和位置。一般而言，样品量在最小检测限的几倍至几十倍是比较恰当的。点样量一般为几微升。展开展开剂流速*展开剂在薄层中的流速与展开剂的粘度、表面张力、吸附剂种类、粒度、均匀度、展开距离等因素有关。薄层板上吸附剂的颗粒越粗，展开剂迁移速度越快；薄层板上吸附剂的颗粒越细且均匀，展开剂移动速度越慢。展开*展开器皿使用的器皿一般为长方形密闭玻璃缸，称为层析缸或色谱缸。展开方式常用上行法，另外还有下行法、径向展开、多次展开、双向展开。展开过程中注意溶剂蒸气饱和*边缘效应同一物质在同一薄层板上出现中间部分的Rf值比边缘的Rf值小，这种现象称为边缘效应。产生原因防止边缘效应密闭容器，先用溶剂蒸气饱和。010302显色—斑点的定位*无色物质喷洒显色剂在荧光背景下呈现暗斑02有紫外吸收紫外灯下观察有色物质日光下观察01定性和定量分析01定性分析－Rf值01定量分析－洗脱法直接定量法目视比色法薄层扫描法01五、高效薄层法*高效薄层色谱法（highperformancethinlayerchromatography；HPTLC）是在现代色谱理论指导下，以经典薄层色谱法为基础发展起来的一种新型薄层色谱技术。特点*分离效率高分析速度快检测灵敏度高等特点高效薄层色谱法与经典薄层色谱法比较见表18-2*平面色谱法planechromatography色谱分类*GCLCSFC柱色谱平面色谱HPCE薄层色谱纸色谱薄层电泳概述*平面色谱法是在平面上进行分离的一种色谱方法01是一种基于混合物组分在固定相和流动相之间的不均匀分配或保留而将其分离的方法02特点：*3241方便、快速、成本较低，易于推广展开剂选择范围宽样品的预处理比较简单应用范围广历史简介*11938年，俄国人Izmailov和Shraiber首先实现了在氧化铝薄膜上分离一种天然产物。21949年，两位美国化学家报导了用薄层色谱法成功地分离了精油中的萜烯。31958年，德国化学家Stahl系统描述了用作涂布薄层的材料（薄层色谱固定相）和涂板设备，对薄层色谱技术也进行了规范化描述。4Stahl于1965年出版了《薄层色谱法》一书。20世纪80年代*出现了仪器化薄层色谱法，薄层色谱的每一步均用仪器来代替以往的手工操作，再配以薄层扫描仪，这样就使薄层色谱法的定量结果的重现性和准确性大大提高。平面色谱参数*定性参数01相平衡参数02面效参数03分离参数04（一）定性参数*比移值（Rf）Rf=L/L0相对比移值（Rr）Rr=Rf(i)/Rf(s)=Li/Ls最佳范围0.3~0.5可用范围0.2~0.8相平衡参数分配系数（distrabutioncoefficient;K）容量因子（capacityfactor;k）保留比R’是在单位时间内一个分子在流动相中出现的几率。在平面色谱中，也可表示组分分子在平面上移动的速度Rf为1的组分，K与k为0，表示该组分不被固定相保留；4Rf为0的组分，K与k为?，表示该组分停留在原点，完全被固定相所保留。5当Vs和Vm固定时，Rf由K决定1K不等是分离的前提2当实验条件固定时，K只与组分性质有关3思考题：下列色谱参数中数值在0～1之间的是（）*A．RfB．rC．R′D．k0102（三）面效参数*01L为原点到斑点中心的距离，W为组分斑点的纵向宽度。理论塔板数02H=L0/nL0为斑点到溶剂前沿的距离塔板高度（四）分离参数*分离度（resolutionR）分离数（separationnumberSN）2dW1+W2R=（四）分离参数*分离数（separationnumberSN）在相邻峰的分离度为1.177时，在Rf=0及Rf=1两种组分的色谱峰间能容纳的色谱峰数。SN越大，