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以铜为镜,可以正衣冠;以古为镜,可以知兴替;以人为镜,可以明得失。——《旧唐书·魏征列传》
《医学微生物学》动物接种实验与病毒培养技术实验
实验动物在病原微生物中的研究上占有重要地位。利用实验动物可以进行病原菌的分离鉴
定、毒力的检测、制备免疫血清等生物制品;进行各种皮肤试验;建立人工感染的动物模型;
进行发病机制、疾病防治以及免疫机制的研究等。
一、实验动物的管理
1.实验室常用的动物:家兔、豚鼠、小白鼠、大白鼠、地鼠、绵羊、鸡等,根据实验的
目的选择最适宜的动物。
2.实验动物必须与正常动物分开饲养,动物室内要经常保持清洁和空气畅通,并应有防
蚊、防蝇、防逃跑及保暖设备。
3.实验动物要精心饲养,喂以适当的饲料并给以充足的水,任何动物也不要断水。
4.实验动物要有详细的记录,包括性别、体重、体表特征(如毛色等)、接种材料、接种
日期、接种途径、剂量、次数以及接种变化等。
5.实验动物应做好标记,对较大动物如家兔、豚鼠等可用金属号码牌固定于耳朵上,对
较小动物如大白鼠、小白鼠等可用复红(或苦味酸等染料)涂于身体的不同部位,以资识别。盛
装动物的笼具等,也应付以标签。
6.接种后的动物应每天观察1~2次,注意动物的精神状态,活动能力、饮食和大小便情
况,体温、注射部位的反应以及全身反应,如不安、耸毛、震颤、弓背、麻痹及死亡等,并应
详细记录之。
7.感染动物死亡后,应立即剖检或暂时冻存。动物的排泄物及使用的笼具等必须严格消
毒。任何用过的动物,不宜再做其他试验。
二、实验动物的选择
选择实验动物应注意以下几点:
1.易感性:是选择实验动物的首要条件。
2.动物健康:体质健康、发育正常、体重适宜;最好使用自己繁殖的动物,由市场购买
的动物至少经过一周的隔离观察,证明无隐性感染方可使用;某些特殊实验应需选用专门喂养
繁殖的无菌动物;实验动物应容易获得,便于喂养和管理。
3.动物大小:同一实验应选用大小一致的动物,通常以年龄或体重为标准。
以铜为镜,可以正衣冠;以古为镜,可以知兴替;以人为镜,可以明得失。——《旧唐书·魏征列传》
4.性别:某些实验最好选用同一性别,特别是免疫的动物和需要观察较长时间的实验动
物。
5.动物品系:某些实验要求使用纯系动物,纯系小鼠用于免疫学、杂交瘤及病毒感染等
研究。
三、小白鼠腹腔接种
[目的要求]
l.掌握小白鼠腹腔接种的实验方法。
2.了解动物接种在微生物分离和鉴定中的作用。
3.了解其他的动物接种方法,如动物皮下、皮内、肌肉、家兔耳静脉注射等接种方法。
4.了解实验动物的处死和尸检的方法。
[原理]
在临床微生物实验室中,动物接种主要用于分离和鉴定病原微生物。通过在易感和不易
感动物体内传代,微生物的各种性质都可能发生变化。常用的实验动物包括大鼠、小鼠、豚鼠、
家兔及绵羊等。常见的接种部位包括皮内、皮下、肌肉、静脉、腹腔及脑内等部位。本实验主
要进行小鼠的腹腔内接种。
[器材和动物]
1.菌液肺炎链球菌培养液。
2.器具鼠笼、无菌注射器、棉球煮针锅、剪刀、解剖台、大头针、纸张。
3.试剂碘酒、酒精、3%来苏儿、凡士林。
4.动物小白鼠。
[步骤和方法]
1.接种方法:
(1)用无菌注射器以无菌操作方式吸取肺炎链球菌培养液,吸取量稍多于使用量,排除气
泡(将注射器针头朝上,使气泡上升,在针头上裹以消毒棉球,然后轻轻推出,须避免菌液四
溅,特别注意防止眼结膜感染)。
(2)用右手轻拖小白鼠尾,使其爬行于粗糙物面上,再用左手拇指和示指抓紧小白鼠两耳
及颈项皮肤,鼠体被固定在左手手指与掌间,用左手无名指和小指夹住鼠尾,用碘酒消毒腹壁
皮肤。
(3)左手倾斜,使小鼠头部稍向下,将预先准备好的菌液注入腹腔内,注射时右手持已吸
以铜为镜,可以正衣冠;以古为镜,可以知兴替;以人为镜,可以明得失。——《旧唐书·魏征列传》
有菌液的注射器,针尖自小白鼠左侧腹股沟处刺穿皮肤,使针尖(针头宜小,常用5号针头)
在皮下组织内向
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