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章节
第七章平面色谱法
讲
授
内
容
1、薄层色谱法的原理,比移值Rf,相对比移植Rst的定义,计算,应用。固定相,流动相及其选择。
2、薄层色谱法基本技术。薄层的制备、点样、展开、显色定位、定性、定量措施。
3、高效薄层色谱法HPTLC的特点,与一般TLC的比较。
4、纸色谱法
课时安排
2课时
教
学
目
的
通过本章学习掌握薄层色谱法的原理,熟悉基本TLC技术。熟悉高效薄层色谱法。
重
点
薄层色谱法的原理,薄层的制备、点样、展开、显色定位、定性、定量措施
难
点
薄层的制备、点样、展开、显色定位、定性、定量措施
教
法
举
要
演示法·讲授法·比较法·提问法·多媒体辅助教学法
教
具
准
备
计算机多媒体设备、自制课件、Powerpoint、Flash软件
教
学
参
考
资
料
1、李发美主编,《分析化学》(第五版),人民卫生出版社。
2、朱明华主编,《仪器分析》(第二版),高等教育出版社,1993年。
教
学
后
记
结合试验课深入巩固理解平面色谱的操作环节及措施。
教案首页
教学过程:
教师活动
教学内容
学生活动
备注
【引入】
第一节课
【讲授新课】
【幻灯显示】
【举例】
【教师活动】
在平面上进行分离的一种色谱措施,重要包括薄层色谱法和纸色谱法。
第一节平面色谱法的分类和原理
分类
1、薄层色谱法:
吸附薄层色谱法
分派薄层色谱法
分子排阻薄层色谱法
2、纸色谱法:分派
3、薄层电泳法
二、平面色谱法参数
定性参数
相平衡参数
面效参数
分离参数
(一)定性参数
1、比移值(Rf值)
溶质移动距离与流动相移动距离之比。(速度之比?)
Rf=L/L0(定期展开)
L为原点(origin)至斑点中心的距离,L0为原点至溶剂前沿(solventfront)的距离
与组分及色谱条件有关
2、相对比移值(relativeRf;Rr)
Rr=Rf(i)/Rf(s)=L(i)/L(s)
与组分、色谱条件、参照物质有关。
Rr值可以不小于1,也可以不不小于1。
重现性和可比性均比Rf值好,能消除系统误差(参照物质与组分在完全相似的条件下展开)
二、相平衡参数
分派系数K=Cs/Cm
容量因子k=CsVs/CmVm
K、k与Rf值的关系:
教学内容
回答:平面色谱分类
学生回答
认真听讲
学生推导公式
学生活动
复习巩固并导入新课
(约2分钟)
教与学的互动能活跃课堂气氛
举例阐明,从而激发学生的学习爱好。
备注
【幻灯显示】
【讲述】
【幻灯显示】
【讲述】
【幻灯显示】
【讲述】
【幻灯显示】
【提问】
【讲述并提问】
【设问】
【幻灯显示】
【引入下一问题】
【引入下一问题】
【幻灯显示】
【讲述】
【幻灯显示】
【设问】
【总结并幻灯显示】
【讲述】
【板书】
【设问引入】
第二节课
【幻灯显示】
【讲述】
【幻灯显示】
【讲述】
【幻灯显示】
【讲述】
【幻灯显示】
【讲述】
【幻灯显示】
【幻灯总结】
布置作业
第二节薄层色谱法
(thinlayerchromatography;TLC)
定义:
固定相(吸附剂或载体)涂布成一均匀薄层,点样,(密闭的容器中)展开,斑点显色,(与对照物质)比较进行定性定量。
特点:快,需十至几十分钟,同步展开多种试样。
试样预处理简朴,对试样限制少。
载样量比较大,合用于制备。
仪器简朴,操作以便。
分离能力较强。
敏捷度较高。
一、薄层色谱法的重要类型和原理
吸附薄层色谱法
原理:组分在薄层板上吸附、解吸附、 再吸附、再解吸附的过程。
吸附系数不等实现分离。
一般极性强的组分K大,Rf值小;极性弱的组分K小,Rf值大。
薄层色谱法的重要类型和原理
分派薄层色谱法
原理:多次分派的过程,分派系数(溶解度)不等实现分离
分类:正相色谱、反相色谱
正相色谱:水为固定相(硅胶载体),有机溶剂为流动相。
极性强的组分K大,Rf值小。
反相色谱:烷基化学键合相为固定相,水-有机溶剂为流动相。
极性强的组分K小,Rf值大。
二、吸附薄层色谱的吸附剂和展开剂
(一)、吸附剂
硅胶:多孔性微粒,表面带有硅醇基,呈弱酸性。
原理:硅醇基(吸附中心)与极性基团形成氢键(吸附性)。
组分与硅醇基形成氢键(被吸附)的能力不一样而分离。
应用:酸性和中性物质的分离,如有机酸酚类、醛类等
硅胶活度与含水量的关系:含水量高,活性级高,活度低。
活化:加热至100℃左右,除去吸附水提高 活度。(注意温度不可过高)
分离效率:与其粒度、孔径及表面积等有关。
常用硅胶:
硅胶H,不含黏合剂
硅胶G,含煅石膏
硅胶GF254,含煅石膏和一种无机荧光剂,即锰激活
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