高中生物浙科版选择性必修3第一节 微生物的培养需要适宜条件-教学课件 (1).pptx

微生物的培养需要适宜条件主讲教师：刘奇洋学校：浙江省江山中学学科：生物学（浙科版）

情境：传统自制葡萄酒的原理是利用葡萄表面野生的酵母菌进行发酵酿制葡萄酒。自制葡萄酒虽然方便，但是食用自制葡萄酒导致胃肠不适的事例略见不鲜。问题：为什么野生酵母菌可以在葡萄匀浆中繁殖与发酵，自制葡萄酒又为什么容易导致胃肠不适呢？

市场中可以购买到高纯度的酿酒酵母，这些酿酒酵母是如何获得的，培养高纯度单一微生物需要哪些条件呢？任务一：分析培养微生物所需要的条件

微生物微生物是人们对所有形体微小、肉眼不可见的生物的统称。酵母菌青霉菌大肠杆菌衣藻确保其它微生物无法混入培养基无菌技术提供合适的生长环境

一、培养基1.定义人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出适合其生长繁殖的营养基质。①培养、分离、鉴定、保存微生物2.用途②积累其代谢物

3.培养基的种类液体培养基不含凝固剂，呈液体状态液体培养基+琼脂固体培养基①分类依据：物理性质（有无加入琼脂）

固体培养基可以形成肉眼可见的菌落。菌落：由单个微生物在固体培养基繁殖形成以母细胞为中心的一团肉眼可见的细胞团。细菌放线菌霉菌酵母菌

液体培养基分离、计数、鉴定、保存菌种固体培养基扩大培养微生物①分类依据：物理性质（有无加入琼脂）3.培养基的种类

②分类依据：功能混合样品选择培养基上部分菌种才能生长普通培养基上所有菌种都能生长选择培养基3.培养基的种类

②分类依据：功能目的菌鉴别培养基上目的菌周围出现色圈非目的菌鉴别培养基上非目的菌周围无明显现象鉴别培养基3.培养基的种类

③分类依据：化学成分天然培养基合成培养基含化学成分不明确的天然物质培养基成分明确3.培养基的种类

活动1：结合微生物细胞的组成元素，分析培养基的需要的组成成分大量元素C、H、O、N、P、S、K、Ca、MgFe、Na、Cu、Zn、Mn、Co、Mo、Ni、B等微量元素

水碳源氮源无机盐生长因子4.培养基的组成成分

酿制葡萄酒的葡萄果浆主要营养成分表组分含量作用碳水化合物13%蛋白质0.6%H2O67%无机盐1%评价：分析葡萄果浆各营养成分的作用碳源维生素微量碳源、氮源细胞组分，良好溶剂，参与代谢维持渗透压，影响细胞生长生长因子

活动2：对比下列两种培养基的成分，分析培养基的理化性质的差异

5.培养基的理化性质培养基的理化特性要满足微生物生长对营养物质、pH、氧气、渗透压的要求细菌培养基：营养物质N/C比要求高，表现为喜荤pH一般要求中性偏碱霉菌培养基：营养物质C/N比要求高，表现为喜素pH一般要求中性偏酸细菌喜荤，霉菌喜素

问题：如何确保培养基不被污染呢？

二、无菌技术获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术应围绕着如何避免杂菌污染展开。消毒灭菌防腐

1.消毒使用较温和的物理、化学等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。煮沸巴氏消毒消毒剂紫外线

2.灭菌用强烈的理化方法杀死物体内外的所有的微生物，包括芽孢。某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成的抗逆性极强的休眠构造。芽孢萌发可形成细菌体。芽孢胞外壁芽孢衣皮层芽孢质芽孢核区芽孢膜芽孢壁

高压蒸汽灭菌灼烧灭菌法高压蒸汽灭菌锅接种环灼烧灭菌过滤除菌法G6玻璃砂漏斗2.灭菌

2.灭菌高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌锅利用沸水流通蒸汽高压蒸汽进行灭菌的方法高压蒸汽灭菌1kg/cm2121℃15~20min500g/cm2112℃30min常规不耐高温成分

灼烧灭菌充分燃烧层2.灭菌

G6玻璃砂漏斗除菌玻璃砂漏斗根据其过滤层孔隙的大小分为G1-G6，其中G6不允许细菌通过，从而达到除菌的目的。过滤的效率如果太慢，可以搭配抽滤套装进行抽滤，加快过滤。G6玻璃砂漏斗抽滤套装2.灭菌

3.防腐控制理化因素抑制微生物生长和繁殖除氧剂、低温、盐腌、糖渍、干燥等素材来源：百度图片

评价：针对不同对象的无菌操作方法1.常见耐高温的玻璃仪器，如培养皿、培养瓶等2.尿素等在高温易分解的培养基成分3.葡萄糖等易碳化的不耐高温的培养基成分4.接种工具：接种环和涂布器5.实验操作台及实验室高压蒸汽灭菌1kg/cm2121℃15~20min过滤除菌高压蒸汽灭菌500g/cm2112℃30min涂布器可浸泡于75%的酒精，灼烧灭菌紫外线，过滤风等

任务二：结合微生物的培养要求尝试配制培养基提供合适的生长环境确保其它微生物无法混入培养基无菌技术如何利用常见材料制作简易的培养基用于培养酵母菌呢？

活动3:配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基3.方法步骤①计算：根据配方计算出所需的马铃薯、蔗糖和琼脂的用量②配制20%马铃薯浸汁：去皮→称重→切块→加水