基因诊断与基因治疗.pptVIP

21基因治疗的受体细胞有生殖细胞和体细胞两大类。但由于涉及安全性和伦理学问题，目前基因治疗中禁止使用生殖细胞作为靶细胞，只限于使用体细胞。对生殖细胞进行基因治疗，可使该生殖细胞分化发育成长的个体及其后代均具有正常基因，理论上讲是根治遗传病的理想方法。3（三）靶细胞的选择基因诊断与 蔡运基因治疗基因诊断与 ××基因治疗基因诊断利用现代分子生物学和分子遗传学的技术方法，直接检测基因结构及其表达水平是否异常，从而对疾病做出诊断的方法。基因治疗基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病，以达到治疗目的。从广义说，基因治疗还可包括从DNA水平采取的治疗某些疾病的措施和新技术。基因诊断的特点针对性强灵敏性高特异性强检测样品获取方便适应性强基因诊断常用的技术方法核酸分子杂交DNA芯片限制性内切核酸酶酶谱分析聚合酶链反应单链构多态性检(SSCP)DNA序列测定Southern印迹杂交提取RNA样本→RNA变性→琼脂糖凝胶电泳分离→转移至膜→探针（标记DNA或RNA）与之杂交→显影或显色→检测信号。Northern法可用于检测组织细胞中总RNA或mRNANorthern印迹杂交法PCR产物变性后，经聚丙烯酰胺凝胶电泳，正常基因和变异基因的迁移位置不同，可分析确定致病基因的存在。PCR/单链构象多态性分析（SSCP）过程原理01基因置换02基因添加03基因干预04自杀基因治疗05基因免疫治疗基因治疗的策略一、基因置换二、基因添加三、基因干预四、自杀基因治疗五、基因免疫治疗基因治疗的两种方式1只限于某一体细胞的基因的改变2只限于某个体的当代体细胞基因治疗1对缺陷的生殖细胞进行矫正2当代及子代生殖细胞基因治疗存在的一些问题1对特定座位基因转移，目前还存在较大困难；2随机插入可能引起后代的基因突变。体细胞基因治疗1）靶细胞的遗传修饰至今尚无实质性展；2）基因转移效率不高，只能用显微注射法；3）只适用于排卵周期短而次数多的动物，很难适用于人类。（但目前辅助生殖技术的发展较为有效的解决了获取卵细胞的办法。一次可获取少者3-5个，多者十几个。）生殖细胞基因治疗基因治疗的基本程序在了解疾病发生的分子机制基础上，选择对疾病有治疗作用的特定基因。治疗性基因获得的方法很多：用酶切或探针杂交法从基因组DNA文库获得，从cDNA文库获取，PCR扩增，人工合成等。12（一）治疗性基因的获得1基因治疗关键步骤之一，是将治疗基因高效转移入患者体内、并能调控其适度表达。2常用的载体有两类：病毒载体和非病毒载体。3病毒载体：逆转录病毒载体，腺病毒载体，腺相关病毒载体等；4非病毒载体：与病毒载体的主要区别在于：采用理化方法将治疗基因转移入患者体内。（二）基因载体的选择基因诊断与 蔡运基因治疗基因诊断与 ××基因治疗