（三年模拟精选）高考生物 第十单元 专题二十二 微生物的利用（全国通用）.docVIP

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【大高考】（三年模拟精选）2016届高考生物第十单元专题二十二微生物的利用（全国通用）

A组基础巩固

1.(2015·四川遂宁零诊考试)下表是某同学列出的分离土壤中微生物培养基的配方，据此回答下列问题：

培养基配方

KH2PO4

1.4g

Na2HPO4

2.1g

MgSO4·7H2O

0.2g

葡萄糖

10.0g

尿素

1.0g

琼脂

15.0g

将上述物质溶解后，用蒸馏水定溶到1000mL

(1)从作用上看，该培养基属于________培养基，提供氮源的物质是________，细菌能利用该氮源是由于体内能合成________酶。

(2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入________指示剂，若指示剂变________，说明有目的菌株存在。

(3)为了测定微生物的数量，接种时应采用________法，某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1mL，培养后菌落数分别为180、155、176、129个，则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量为________，测定的活菌数比实际活菌数________(填“低”“高”“基本一致”)。

解析(1)题干指出下表是分离土壤中微生物的培养基的配方，其中尿素是作为唯一氮源，能生长的菌落说明能利用尿素中的氮源，所以该培养基从用途上属于选择培养基。细菌能利用该氮源是由于体内能合成脲酶。

(2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，说明有目的菌株存在。

(3)纯化微生物可以用稀释涂布法和平板划线法，其中稀释涂布法能用于微生物的计数。1毫升原土壤样液中上述微生物数量＝(180＋155＋176＋129)÷4×106×10＝1.6×109个；用稀释涂布平板法进行微生物的计数，但统计的数量比实际数量会偏少，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

答案(1)选择尿素脲(催化尿素分解的)(2)酚红红(3)稀释涂布平板1.6×109低

2.(2015·北京海淀模拟)为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作。

(1)为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是______________________________________________________。

制备的培养基常用________法进行灭菌。

(2)科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液。为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行________，用________法接种于固体培养基上。接种后的培养基________状态放入培养箱。

K2HPO4

MgSO4

NaNO3

FeSO4

琼脂

0.1g

0.5g

3g

0.01g

2g

15g

加至1L

(3)选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液(果胶与刚果红结合后显红色)，一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和________直径的比值，筛选果胶酶高产菌株。

(4)将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的________(填“上清液”或“沉淀物”)获得粗提的果胶酶。将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性。进行吸光值测定时，需将________与等量果胶溶液混合，作为实验的对照。

解析(1)由于实验目的是分离果胶酶产生菌，所以培养基中需要加入果胶，在配制过程中，需要用蒸馏水先配制成液体培养基，再凝固成固体培养基。制备的培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。

(2)为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行梯度稀释，并用稀释涂布法接种于固体培养基上。接种后的培养基倒置状态放入培养箱，防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染。

(3)选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液(果胶与刚果红结合后显红色)，一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和水解直径的比值，筛选果胶酶高产菌株。

(4)将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的上清液获得粗提的果胶酶。将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性。进行吸光值测定时，需将等量失活的粗提果胶酶与等量果胶溶液混合，作为实验的对照。

答案(1)果胶和蒸馏水高压蒸汽灭菌

(2)梯度稀释(稀释)涂布倒置

(3)水解(或“透明”)

(4)上清液等量失活的粗提果胶酶

3.(2014·荆门调研)从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。

(1)接种前要对