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课时分层训练(三十八)
(建议用时:45分钟)
A组基础达标
1.(2016·天津高考)人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值,只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。
(1)为获取HSA基因,首先需采集人的血液,提取________合成总cDNA,然后以cDNA为模板,使用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向,请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向。
(2)启动子通常具有物种及组织特异性,构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体,需要选择的启动子是________(填写字母,单选)。
A.人血细胞启动子
B.水稻胚乳细胞启动子
C.大肠杆菌启动子
D.农杆菌启动子
(3)利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是
_____________________________________。
(4)人体合成的初始HSA多肽,需要经过膜系统加工形成正确空间结构才有活性。与途径Ⅱ相比,选择途径Ⅰ获取rHSA的优势是___________________。
(5)为证明rHSA具有医用价值,须确认rHSA与________的生物学功能一致。
【解析】(1)要想合成总cDNA,需要采集人的血液获得总RNA。由于DNA的复制只能从脱氧核苷酸单链的5′端向3′端延伸,因而引物均应结合在DNA单链的3′端,而DNA的两条链反向平行,由此可以确定引物在另一条脱氧核苷酸单链的位置和方向。(2)若要从水稻胚乳细胞内获得目的产物,需要控制该目的基因只在水稻胚乳细胞内表达。由题干中的信息“启动子通常具有物种及组织特异性”可知,此处需要选择水稻胚乳细胞启动子。(3)酚类物质能吸引农杆菌,因此在水稻受体细胞中添加该类物质,能吸引农杆菌移向水稻受体细胞,有利于目的基因的成功转化。(4)途径Ⅰ和Ⅱ的主要区别是途径Ⅰ的受体细胞是真核细胞,途径Ⅱ的受体细胞是原核细胞。由于人体合成的初始HSA多肽需要经膜系统加工形成正确的空间结构才有生物活性,所以选择途径Ⅰ获取rHSA更具有优势。(5)rHSA是基因工程的产物,其是否具有医用价值,还需要在个体水平上进一步确认其与HAS的生物学功能是否一致。
【答案】(1)总RNA(或mRNA)
(2)B(3)吸引农杆菌移向水稻受体细胞,有利于目的基因成功转化(4)水稻是真核生物,具有膜系统,能对初始rHSA多肽进行高效加工(5)HSA
2.(2017·云南师大附中模拟)根据基因工程的有关知识,回答下列问题:
(1)cDNA文库属于________基因文库,其构建方法是:用某种生物发育的某个时期的________通过反转录产生cDNA片段,与________连接后储存在一个受体菌群中。
(2)切割DNA分子的工具是________________,它能使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的____________断开,形成黏性末端或平末端。
(3)基因工程中所使用的DNA连接酶有两类。既可以“缝合”黏性末端,又可以“缝合”平末端的是________DNA连接酶。
(4)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是____________;如果受体细胞是大肠杆菌,需要用________处理细胞,使之成为感受态细胞,才能吸收DNA分子。
【解析】(1)cDNA文库属于部分基因文库。构建cDNA文库的方法是将某生物生长发育某个时期的mRNA反转录得到DNA片段,然后将其与载体连接导入受体菌群中。(2)切割DNA用限制性核酸内切酶,限制酶切割的是磷酸二酯键。(3)常用的DNA连接酶有两种,E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端,而T4DNA连接酶既能连接黏性末端也能连接平末端。(4)将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法,其中农杆菌转化法使用最多。当受体细胞是原核细胞时,通常用Ca2+处理细胞,使其成为感受态细胞,更容易吸收外源DNA。
【答案】(1)部分
mRNA载体(2)限制性核酸内切酶磷酸二酯键
(3)T4(4)农杆菌转化法Ca2+
3.(2017·湖北武汉二月调研)下图是获得转基因抗虫棉的技术流程示意图。请回答下列问题:
(1)A→B利用的技术称为________,其中②过程需要热稳定的________酶才能完成。
(2)图中将目的基因导入棉花细胞需要经过C过程,该过程为构建______,其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在且可以遗传给下一代,并能表达。
(3)上述流程示意图中,将目的基因导入棉花细胞所采用的方法是____法,该方法一般________________(填“适宜”或“不适宜”)用于将目的基因导入单子叶植物。
(4)从F→G的过程利用的主要技术为________
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