体外受精-胚胎移植技术.ppt

生殖道液体中存在诱导获能和顶体反应的因子和钙离子。01加入诱导获能的有效成分：02钙离子载体、氨基多糖、脂类、咖啡因、肾上腺素、cAMP、鞘磷脂酶等。03Ⅰ.精子体外获能的主要途径02钙离子载体精子的顶体反应是一个Ca2+依赖过程。钙离子载体携带钙离子进入精子内，可诱发顶体反应并激活顶体酶。03氨基多糖法（GAGs)GAGs可促进精子对Ca2+的吸取，从而诱发顶体反应。其作用程度有赖于氨基多糖的硫酸化程度。肝素是硫酸化程度最高的GAG，其作用也最强。高离子强度液置换精子表面抗原物质或去能因子，从而诱发顶体反应。0101代谢改变，呼吸代谢明显增加。03顶体形态变化，顶体帽部分的质膜和顶体外膜在多处发生融合，膜泡状化。02运动方式改变，超活化运动。04超活化运动发生于顶体反应之前。（二）获能精子的特征及检测获能精子的特征2、获能精子的检测运动方式：镜检精子活力、运动类型和运动速度。顶体反应：顶体反应是判断精子获能的有效方法之一。电镜：头部质膜与顶体外膜泡状化，或仅残存顶体内膜。顶体染色法(三重染色技术)光镜观察：品红色，无顶体反应。白色，有顶体反应。蓝黑色，死精子棕色，活精子。顶体帽顶体后区将获能精子与成熟卵子置于受精液中共同培养，使之完成受精过程。影响因素：精子浓度精卵相遇的时间操作：石蜡油中悬浮0.1mL小液滴（精液），移入10-15枚成熟卵母细胞/小液滴，培养箱中培养至囊胚。1.6体外受精应用研究领域治疗不孕症。胚胎工厂化生产，为胚胎移植业开辟胚胎来源。保护珍稀动物种质资源。基础研究领域再现体内受精过程，揭示受精的本质和机理，研究胚胎的分化和发育。1.7研究意义2.胚胎移植1定义:胚胎移植(EmbryoTransfer)又称受精卵移植，俗称借腹怀胎，是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。Embryotransferreferstoastepintheprocessofassistedreproductioninwhichembryosareplacedintotheuterusofafemalewiththeintenttoestablishapregnancy.Thistechnique(whichisoftenusedinconnectionwithinvitrofertilization(IVF)),maybeusedinhumansorinanimals,inwhichsituationsthegoalsmayvary.1890年，Heape在英国剑桥大学首次报道获得兔子胚胎移植成功。20世纪30年代后开始大量研究，1951年willett首次成功地进行了牛的胚胎移植。1974年，第一头胚胎移植的何斯坦奶牛在美国出生。1976年，一些研究小组报道了采用导管高效采集胚胎的非手术方法，随后胚胎移植在奶牛中的应用得到飞速发展。我国对牛胚胎移植研究起步较晚，1978牛手术法胚胎移植犊牛降生，1980年非手术法移植成功，1982年冷冻胚胎移植成功。2.2胚胎移植的发展历史2.3胚胎移植的基本原则胚胎移植前后所处的环境的同一性供体和受体在分类学上属于同一物种胚胎发育阶段与受体发情时间上的一致性胚胎发育阶段与受体生殖道解剖位置的一致性胚胎质量经济效益和科学价值体外受精-胚胎移植技术（IVF-ET）1.体外受精1定义：体外受精(InVitroFertilization)是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术，英文简称为IVF。Invitro?fertilization?or?fertilisation?(IVF)isaprocessbywhich?anegg?isfertilised?by?sperm?outsidethebody:?invitro?(inglass).Theprocessinvolvesmonitoringandstimulatingawomansovulatoryprocess,removing?anovumorova?(eggoreggs)fromthewomans?ovaries?andlettingspermfertilisetheminaliquidinalaboratory.Thefertili