第四章药物定量分析与方法验证ppt课件.pptxVIP

第四章药物定量分析与分析方法验证;基本要求;重量分析法

容量分析法

光谱分析法

色谱分析法;一、重量分析法;（一）容量分析法的特点

操作简单、快速；

比较准确（相对误差＜0.2%）；

仪器普通易得

常用于测定高含量或中含量组分，原料药含量测定首选;（二）容量分析法的计算问题

1.滴定度（T）：

每1ml规定浓度的滴定液相当于被测物质的质量(mg)

2.滴定度的计算

aA（待测物）+bB（滴定液）cC+dD

ab

T/M1·m

;（3）以相当于标示量%表示;光谱

光谱分析法

分光光度法

分类紫外-可见分光光度法

红外分光光度法

原子吸收分光光度法

荧光分光光度法

;三、光谱分析法

（一）紫外-可见分光光度法

吸收光谱范围：紫外：200～400nm

可见：400～760nm

灵敏度高，可达10-4g/ml～10-7g/ml

1.特点准确度高，RE（%）为2%～5%

仪器价格低廉，操作简单，易普及，应用广泛

2.朗伯-比耳定律A=ECL

吸收系数：摩尔吸收系数ε——研究分子结构

百分吸收系数Ｅ——含量测定;3.测定方法

要求供试品溶液的A应在0.3～0.7

1）对照品比较法：A供／A对＝C供／C对

;2）吸收系数法：;3）计算分光光度法：

多种，具体按每种药物规定的方法进行如：VA的三点校正法;（二）荧光分析法

灵敏度高，可达10-10g/ml～10-12g/ml

在低浓度进行测定，防止自熄灭作用

1.特点用基准溶液校正仪器灵敏度

制备荧光衍生物，可提高灵敏度和选择性

干扰因素多，需做空白实验

样品用量少，操作简单，应用范围较广

;2.含量测定

原理：当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件固定时，物质在一定浓度范围内，其荧光强度R与该物质浓度C成正比

方法：对照品比较法

计算：;

根据混合物中各组分的色谱行为差异，先行分离后再在线或离线对各组分逐一进行分析的方法，是分离分析混合物的最有力手段。

按分离原理：吸附；分配；离子交换；排阻色谱

分类

按分离方法：PC；TLC；柱色谱；GC；HPLC

;1.对仪器一般要求

固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变

其他均可适当改变

色谱图20分钟内记录完毕

2.系统适用性试验

色谱柱的理论板数：n=5.54(tR/Wh/2)2

分离度：R=2（tR1–tR2)/(W1+W2);应大于1.5

重复性：对照液连续进样5次，峰面积RSD≤2.0％

拖尾因子：T=W0.05h/2d1应在0.9～1.05

;流动相;液质联用仪;流动相：对于以C18为固定相的反相色谱系统，常用甲醇-水，间或加以乙腈、缓冲液等为流动相，有机溶剂比例通常不低于5％;四元泵;自动进样器;色谱柱;检测器;测定方法

1)内标法加校正因子测定供试品中主成分含量;例;2)外标法测定供试品中主成分含量;（二）GC法

1.对GC仪器一般要求

载气：氮气

色谱柱：填充柱或毛细管柱

填充柱：内径2～4mm，长1～10m，内装吸附剂

高分子多孔小球或涂渍固定液的载体

毛细管柱：内径0.2～0.5mm，长10～100m，

一般为空心柱，内壁或载体经涂渍或