仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相.ppt

3.流动相选择*在选择溶剂时，溶剂的极性是选择的重要依据。采用正相液-液分配分离时：首先选择中等极性溶剂，若组分的保留时间太短，降低溶剂极性，反之增加。也可在低极性溶剂中，逐渐增加其中的极性溶剂，使保留时间缩短。常用溶剂的极性顺序：水(最大)甲酰胺乙腈甲醇乙醇丙醇丙酮二氧六环四氢呋喃甲乙酮正丁醇乙酸乙酯乙醚异丙醚二氯甲烷氯仿溴乙烷苯四氯化碳二硫化碳环己烷己烷煤油(最小)4.选择流动相时应注意的几个问题*尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。01避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子。如使固定液溶解流失；酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。02试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀并在柱中沉积。03流动相同时还应满足检测器的要求。当使用紫外检测器时，流动相不应有紫外吸收。04二、分离类型选择

choiceofseparationtypes*气相色谱过程：待测物样品被蒸发为气体并注入到色谱分离柱柱顶，以惰性气体（指不与待测物反应的气体，只起运载蒸汽样品的作用，也称载气）将待测物样品蒸汽带入柱内分离。其分离原理是基于待测物在气相和固定相之间的吸附-脱附（气固色谱）和分配（气液色谱）来实现的。因此可将气相色谱分为气固色谱和气液色谱。气固色谱：利用不同物质在固体吸附剂上的物理吸附-解吸能力不同实现物质的分离。检测器气相色谱检测器种类繁多，本节将介绍最为常用的几种检测器：01020304热导检测器(TCD);氢火焰离子化检测器(FID);电子捕获检测器(ECD);火焰光度检测器(FPD);氮磷检测器（NPD）也称热离子检测器(TID);0102原子发射检测器(AED)03硫荧光检测器（SCD）相对极性P：规定非极性固定液角鲨烷的极性为0，强极性固定液?,?-氧二丙腈的极性为100，其余物质的P在0～100之间，每20单位为一级，即将极性分为5级：0,+1(非极性)；+1,+2(弱极性)；+3(中等极性；+4,+5(强极性)固定液分类及选择：固定液选择：按“相似相溶”原理选择固定液。01非极性组分——非极性固定液——沸点低的物质先流出；02极性物质——极性固定液——极性小的物质先流出；0301各类极性混合物——极性固定液——极性小的物质先流出；03复杂混合物——两种或以上混合固定液02氢键型物质——氢键型固定液——不易形成氢键的物质先流出；柱温降低升高传质快、柱效高纵向扩散强、峰拖尾过高造成固定液流失分析时间长恒温程序升温(宽沸程混合物)实验确定二、高效液相色谱法的特点

featureofHPLC特点：高压、高效、高速高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。(5)液相色谱检测器*01a.紫外检测器02应用最广，对大部分有机化合物有响应。03特点：04灵敏度高；05线形范围高；06流通池可做的很小（1mm×10mm，容积8μL）；07对流动相的流速和温度变化不敏感；08波长可选，易于操作；09可用于梯度洗脱。-刘志广-