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志不强者智不达，言不信者行不果。——墨翟
厌氧菌的培养方法
厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌，必须创造一个
无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂，或用物理、化学方法去除
环境中的游离氧，以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠
培养基，牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多，可根据
实际情况选用。
1.厌氧缸法：接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧
缸内培养，厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌
氧环境，从而将厌氧菌培养出来。
2.厌氧袋：即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透
明而不透气，内装气体发生管、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。
放入已接种好的平板后，尽量挤出袋内空气，然后密封袋口。先折断
气体发生管，后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小时内造成无气环
境。如不突变表示袋内已达厌氧状态，可以孵育（较为推荐）。
3.厌氧手套箱：是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之
一。它是一个密闭的大型金属箱，箱的前面有一个有机玻璃做的透明
面板，板上装有两个手套，可通过手套在箱内进行操作，故名。箱侧
有一交换室，具有内外二门，内门通箱内先关着。欲放物入箱，先打
开外门，放入交换室，关上外门进行抽气和换气达到厌氧状态，然后
手伸入手套把交换室内门打开，将物品移入箱内，关上内门。箱内保
志不强者智不达，言不信者行不果。——墨翟
持厌氧状态，也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合
成水的原理。该箱可调节温度，本身是孵箱或孵箱即附在其内，还可
放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落，这种厌氧箱适于作厌氧细菌的
大量培养研究，大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属
硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。
4.厌氧盒：原理同厌氧袋，有成品销售。
5.生物耗氧法：在一密闭的容器内放以生物，消耗氧气，同时产
生二氧化碳，供细菌生长用。我没见过。
6.焦性末食子酸法：在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸，均匀撒
上焦性末食子酸，然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速将已接
种细菌的平板倒扣在上面，用融化的白蜡封边，造成一个封闭空间。
焦性末食子酸与碱反应后耗氧。该法用于厌氧不严格的厌氧菌的培养，
简单。如有梭状芽孢杆菌。
7.疱肉培养基：本身就是一个不需特殊设备的厌氧培养法。疱肉
和肉汤装入大试管，液面封凡士林，造成无氧环境。
志不强者智不达，言不信者行不果。——墨翟
厌氧菌标本的采集与送检
厌氧菌标本采集与送检必须注意两点：标本绝对不能被正常菌群
所污染;应尽量避免接触空气。
1.采集：
采集标本须注意：不被正常菌群污染，并尽量避免接触空气。采
集深部组织标本时，需用碘酒消毒皮肤用注射器抽取，穿刺针头应准
确插入病变部位深部，抽取数毫升即可，抽出后可排出一滴标本于酒
精棉球上。若病灶处标本量较少，则可先用注射器吸取1ml还原性溶
液或还原性肉汤，然后再抽取标本。在紧急情况下，可用棉拭取材，
并用适合的培养基转送。
用于厌氧菌培养的标本不同于一般的细菌培养，多采用特殊的采
集方法，如针筒抽取等，应严格无菌操作，严禁接触空气。
2.送检方法与处理
标本送到实验室后，应在20～30min内处理完毕，最迟不超过2
h，以防止标本中兼性厌氧菌过度繁殖
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