第十七章-色谱分析法概论-分析化学.ppt

第十七章色谱分析法概论第十七章色谱分析法概论第一节色谱法的分类和发展色谱分析法是一种物理或物理化学分离分析方法。始于20世纪初；30与40年代相继出现了薄层色谱与纸色谱；50年代气相色谱兴起、色谱理论、毛细管色谱；60年代气相色谱-质谱联用；70年代高效液相色谱；80年代末超临界流体色谱、高效毛细管电泳色谱。色谱法的分类：1、按流动相与固定相的分子聚集状态分类气相色谱法(gaschromatography,GC)气-固色谱法（GSC）气-液色谱法（GLC）液相色谱法(liquidchromatography,LC)液-固色谱法（LSC）液-液色谱法（LLC）超临界流体色谱法(supercriticalfluidchromatography,SFC)2、按操作形式分类柱色谱法(填充柱、毛细管柱、微填充柱)平板色谱法(纸色谱、薄层色谱TLC、薄模色谱)毛细管电泳法（CE）3、按色谱过程的分离机制分类分配色谱法吸附色谱法空间排阻色谱法(SEC)离子交换色谱法(IEC)亲合色谱法第二节色谱过程和基本原理二、色谱流出曲线和有关概念基线：在操作条件下，没有组分流出时的流出曲线称为基线。其反映的是仪器（主要是检测器）的噪音随时间的变化。二、色谱流出曲线和有关概念2、色谱峰（流出峰）由电信号强度对时间作图所绘制的曲线称为色谱流出曲线。流出曲线上的突起部分称为色谱峰。正常峰的判断对称因子fS（symmetryfaxtor）或叫拖尾因子对称因子在0.95～1.05之间为对称峰；小于0.95为前延峰；大于1.05为拖尾峰。保留值（滞留值）保留时间tR（retentiontime）：从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔保留时间。死时间t0（deadtime）：分配系数为零的组分的保留时间。调整保留时间tR（adjuxtedtime）：某组分由于溶解（或被吸附）于固定相，比不溶解（或不被吸附）的组分在柱中多停留的时间。tR=tR－t0保留值（滞留值）保留体积（VR）：从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大时，所需通过色谱柱载气体积。VR=tR·FC死体积（V0）：由进样器至检测器的流路中未被固定相占有的空间。调整保留体积（VR）：由保留体积扣除死体积后的体积。保留值（滞留值）相对保留值两组分的调整保留值之比。色谱系统的选择性指标。保留值（滞留值）保留指数（I）：把组分的保留行为换算成相当于正构烷烃的保留行为，也就是以正构烷烃系列为组分相对保留值的标准，用两个保留时间紧邻待测组分的基准物质来标定组分，这个相对值称为保留指数，又称为Kovats指数。保留指数定义式：乙酸正丁酯的保留指数测定参考物质：正庚烷及正辛烷测定结果：死时间30秒、正庚烷204秒、乙酸正丁酯340秒、正辛烷403.4。色谱峰高和峰面积峰高（peakheight;h）：组分在柱后出现浓度极大时的检测信号，即色谱峰顶至基线的距离。峰面积(peakarea;A)：色谱曲线与基线之间包围的面积。色谱峰区域宽度标准差（σ）：σ为正态分布曲线上两拐点之间距离之半。半峰宽（peakwidthathalfheight；W1/2或Y1/2）：峰高一半处的峰宽称为半峰宽。W1/2=2.355σ峰宽（peakwidth；W）：通过色谱峰两侧的拐点作切线，在基线上的截距称为峰宽，也可用Y表示。W=4σ或W=1.699W1/2色谱峰区域宽度分离度（R）分离度是用于衡量分离效果的参数，其定义式如下：R=14σ分离95.4%R=1.56σ分离99.7%三、分配系数与色谱分离1、分配系数在一定温度和压力下，达到分配平衡时，组分在固定相和流动相中的浓度之比三、分配系数与色谱分离3、分配系数和容量因子的关系保留时间与分配系数和容量因子的关系设在单位时间内一个分子在流动相中出现的几率（即在流动相中停留的时间分数）为R/。色谱过程方程：

tR=t0(1+KVS/Vm)色谱过程方程的意义在色谱柱（或薄层板）一定时，Vs与Vm一定；若流速、温度一定，则t0一定。这样，tR取决与分配系数