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海纳百川,有容乃大;壁立千仞,无欲则刚。——林则徐
糖类测定方法大全
(一)测定方法概述
(二)可溶性糖类的提取和澄清
1、提取液制备
(1)常用提取剂——水、乙醇
(2)提取液中含糖量控制0.5~3.5mg/mL
(3)含脂肪食品先脱脂,然后用水提取
(4)含淀粉及糊精食品(乙醇沉淀淀粉等)用70~75%乙醇溶
液提取
(5)含乙醇及CO2液态食品,蒸发至1/3~1/4原体积,以除
去C2H5OH及CO2
海纳百川,有容乃大;壁立千仞,无欲则刚。——林则徐
(6)酸性食品应先中和防止低聚糖部分水解
(7)提取固体样品有时需要加热,以提高提取效果。一般在40~
50℃,防止多糖溶出
(8)乙醇作提取剂加热时应安装回流装置
2、提取液的澄清
(1)影响测定的杂质
色素、蛋白质、果胶、可溶性淀粉、有机酸、氨基酸、单宁,
可影响颜色、浑浊、过滤困难。
(2)澄清剂
①醋酸铅(中性)Pb(CH3COO)2·3H2O,形成沉淀,
吸附杂质,可除去蛋白质、果胶、有机酸、单宁等。
②乙酸锌和亚铁氰化钾二者生成氰亚铁酸锌↓吸附蛋白
质等干扰物。
③硫酸铜和氢氧化钠,Cu离子使蛋白质沉淀。
(3)澄清剂用量
用量适宜,以无新沉淀为准,如2ml饱和醋酸铅(30%)。
(4)除铅剂
由于铅影响还原糖的测定,生成铅糖化合物。
常用除铅剂有草酸钠、硫酸钠、磷酸氢二钠。
(三)蓝—爱农(Lane-Eynon)法
测定还原糖
海纳百川,有容乃大;壁立千仞,无欲则刚。——林则徐
(国际上常用的定量糖的方法)
1、原理
斐林试剂甲液(CuSO4·5H2O)
斐林试剂乙液(酒石酸钾钠+NaOH)
甲、乙混合→酒石酸钾钠合铜
酒石酸钾钠合铜+葡萄糖→葡萄糖酸+Cu2O↓(红棕)
终点的确定:
葡萄糖+亚甲基蓝(氧化态)→亚甲基蓝(还原态)
过量兰色无色
(兰色消失)
终点时的颜色为:兰色消失了的红棕色
2、测定
海纳百川,有容乃大;壁立千仞,无欲则刚。——林则徐
预测
准确吸取斐林试剂甲液5.00mL、乙液5.00mL→锥形瓶中,△至
沸腾,再加入亚甲基蓝指示剂,在加热的条件下,用样液滴至
蓝色褪尽。(先快后慢,要求很快达到终点,因为亚甲基蓝易
被空气氧化为蓝色,且要求在加热的情况下以除去空气)
测定
甲液5mL、乙液5mL→锥形瓶中,加入比上述预测量少0.5~1ml
样液在2min内沸腾,维持沸腾2min,加入3滴亚甲基蓝指示
剂,再在3min内滴定至蓝色褪尽。
3、计算
F
还原糖%=×100
(V1/V)×m
m--样品质量,mg
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