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长风破浪会有时，直挂云帆济沧海。——李白
人民医院基因扩增实验室ABI7500实时荧光定量PCR仪操
作、维护及校准操作规程
1ABI7500实时荧光定量PCR仪概述
7500型荧光定量PCR仪是特异性靶基因检测与定量的
一体化平台。7500型将PCR热循环，荧光检测和各种应用
分析软件结合在一起，可实时定量观察PCR每一循环各反应
管中PCR扩增产物的情况。PCR实验结束后即刻得到定量
结果，无需凝胶电泳分析，无需纯化PCR产物，无需进行任
何实验操作。7500型实时荧光定量PCR仪具有节省时间，
灵敏度高，准确性好和避免产物污染等优点。
2主要技术参数
样品孔数：96孔样品基座，
温度范围：4.0-99.9℃
温度显示：经计算机计算的实际样品温度，精确到0.1℃
加热冷却速度：平均温度变化速度1℃/秒
温度准确性：正负0.25℃，35－100℃范围
升降温重现性：任意温度达到时间误差小于5秒
3操作说明
3.1实验程序运行：
长风破浪会有时，直挂云帆济沧海。——李白
3.1.1首先打开电脑，进入操作系统后，打开7500仪器电
源；
3.1.2双击桌面上的7500快捷方式，进入以下界面：
3.1.3点击，进入以下操作界面，按照默认设置，直接点击“完成”（Finish）：
长风破浪会有时，直挂云帆济沧海。——李白
3.1.4在96孔板中选择所放置样本对应的区域，如下图：
3.1.5点击按钮，在弹出的对话框中选择FAM-TAMRA荧光-淬灭基团，点击“AddTo
PlateDocument”：
3.1.6点击按钮，如图所示，在弹出的对话框中勾选FAM荧光
长风破浪会有时，直挂云帆济沧海。——李白
，内参荧光选择，点击“Close”：
3.1.7在选项下，逐个双击所选样本，设置样本类型和标准点定量
值：
3.1.8点击选项，按照试剂盒说明书设置相应的扩增程序：
长风破浪会有时，直挂云帆济沧海。——李白
3.1.9点击按钮，为使用结果文件设定保存路径和名称。
3.1.10点击“Start”开始运行扩增程序。
3.2实验结果分析：
3.2.1点击按钮，打开使用结果文件；
3.2.2点击选项，进入结果分析操作界面。点击下面的
选项，双击纵坐标，选择Linear项，调整为线性坐标，点击“OK”
确定：
3.2.3选取所有样本，手动设定阈值为最大荧光值的5%左右为宜。（设定原则：改过所
有阴性，使标准曲线相关系数尽可能接近1）。
长风破浪会有时，直挂云帆济沧海。——李白
，点击“Analyze”进行定量分析。
3.2.4点击选项，看相关系数是否0.98，线性是否良好。
长风破
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