内毒素检查法在药品生产质控的应用修改.ppt

?试剂盒组成名称规格数量鲎试剂（TAL）0.2ml/支λ：0.125EU/ml/0.25EU/ml8支工作标准内毒素（CSE）5EU/支1支BET水2ml/支1支检查项目反应管数每管加样阴性对照（溶液D）20.2mLBET水阳性对照（溶液C）20.2mLBET水+0.01mLE5供试品阳性对照（溶液B）20.2mLS+0.01mLE5供试品（溶液A）20.2mLS?使用方法：（λ=0.125EU/mL）2、光度法定性快速检测法属动态浊度或动态显色法需要使用动态光度仪及相应软件方法及步骤1）确定供试品原液（S0）的内毒素限值（L或Lx）2）确定供试品无干扰浓度，如S83）制备不含可测内毒素的供试品S84）制备含L8浓度标准内毒素的阳性供试品S8L85）在日常监测时，以S8L8与TAL反应的时间T0作为判断其它供试品内毒素含量的标准STEP1STEP2STEP3凡是反应时间TT0的供试品，其内毒素含量L8，即原液S0的内毒素含量L凡是反应时间TT0的供试品，其内毒素含量L8，即原液S0的内毒素含量L；只需供试品的动态曲线一达到预设光度值，即可知道该供试品是否合格。甚至分析供试品动态曲线的走势就可知道供试品是否合格。预设透光度值S8L8产品合格S8T(秒)100%95%01Rt产品不合格02NCT1T0T2031属动态浊度法或动态显色法2需要使用安度斯软件“生物探针-2002”3方法及步骤4预先用标准内毒素与TAL反应制备一条标准曲线，存档。最理想的标准曲线是用同体系模型法建立（参阅本公司讲义2005年3月版）；5检测开始前调出存档标准曲线6反应开始后，只要各供试品的动态曲线一达到预设光度值，界面上的表格中立即显示出该供试品的内毒素含量光度法定量快速检测法*****细菌内毒素检查在药品生产质控上的应用冯聚锦湛江安度斯生物有限公司一、鲎试验对药品生产质控的意义药品生产企业实施GMP的意义在于使人们对药品质量的控制从传统的成品检验，上升到对药品生产全过程进行有效监控的现代质量管理模式。美国食品及药物监督管理局（FDA）自2004年起大力推行“过程分析技术”(ProcessAnalyticalTechnology,PAT)，更凸显了医药发达国家对药品生产过程质控的高度重视。在医药工业的GMP条件下，“热原就是内毒素，控制内毒素就控制了热原”已成为共识。基于这种认识，许多国家的药典已由细菌内毒素检查项取代热原检查项并且成为了发展的趋势，将会有越来越多的药典品种使用鲎试剂检查。不仅如此，鲎试验法在医药工业上目前是注射药品生产质控的最好方法，它为众多的药品生产企业带来显著的经济效益。中国和美国是世界上应用鲎试剂最早的国家，也是鲎试剂产量及用量最多的国家。尽管如此，两国在鲎试剂应用的水平、程度及范围上仍有明显的差异。中国药典2010年版收载的BET品种有450多种，而USP收载的BET品种超过700种。70%＜30%生产质控应用领域的比较30%3%30%25%42%美国＞70%————5%＞90%中国终产品检验终点显色动态显色动态浊度凝胶法方法学应用的比较在医药发达国家，一个注射药品生产体系的建立或GMP认证，都要求在生产质控上应用鲎试验方法。我国的GMP认证也有相关的要求，如对制药用水的细菌内毒素监测、原料药的细菌内毒素监测等。事前控制：对正在生产的产品质量控制有效；事后控制：对正在生产的产品质量控制无效，只对以后生产的产品质量控制有效。按控制的时机分类：静态控制：对已完成的生产工序的质控无效，只对以后的生产工序的质控有效；动态控制：对正在进行或将要进行的生产工序的质控有效。按控制的方式分类：二、生产质控的基本特点及要求生产质控对检验方法的要求采样方便、微量操作简单、快速检查准确、灵敏结果可靠，数据处理自动化鲎试验法目前是满足药品生产质控的最好方法鲎试验的优点：采样方便、微量：0.1~1ml操作简便、快速：7~60分钟灵敏、准确：最低可测0.001EU/mL的内毒素含量，定量检测的范围可涵盖0.001~1,000EU/mL。技术成熟，自动化程度高鲎试验是目前能使药品生产的热原控制实现动态监控和事前控制的唯一方法。三、药品生产过程内毒素的控制方法内毒素监控体系监控对象重要的媒体及原料水是制药工业最重要的媒体，是首要的监控对象使用量大的原料生产过程添加的各种辅剂与中间体接触的各种用具、器皿及终产品的包装容器各工序