OsMYBAS1-3转录因子在水稻响应重金属胁迫中的功能研究.pdf

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摘要I

ABSTRACTIII

缩略语5

第一章文献综述1

1重金属对植物的毒害作用1

2植物响应重金属胁迫机理的研究2

2.1细胞壁的阻隔与液泡区室化2

2.2螯合蛋白作用2

2.3抗氧化系统3

2.4离子交互作用3

3MYB转录因子的概况和研究进展4

3.1MYB转录因子的概况4

3.2MYB转录因子家族的结构与分类4

3.3MYB转录因子的功能5

3.4水稻中的MYB转录因子8

4研究的目的及意义9

第二章OsMYBAS1-3的表达模式和生物学功能分析11

1材料与方法11

1.1水稻的培养11

1.2OsMYBAS1-3基因的克隆与生物信息学分析11

1.3CRISPR/Cas9载体构建13

1.4农杆菌介导的突变体水稻的构建16

1.5野生型与突变体水稻的差异分析19

1.6叶枕石蜡切片19

1.7BR敏感性分析20

1.8OsMYBAS1-3基因的组织表达20

1.9亚细胞定位22

1.10数据处理与分析23

2结果与分析23

2.1OsMYBAS1-3基因的克隆与生物信息学分析23

2.2OsMYBAS1-3基因在水稻中的表达模式25

2.3Cu、Cd胁迫下调OsMYBAS1-3基因表达26

2.4OsMYBAS1-3的亚细胞定位分析27

2.5OsMYBAS1-3基因敲除突变体水稻的构建与鉴定27

2.6OsMYBAS1-3基因突变对水稻生长的影响29

2.7OsMYBAS1-3基因突变对水稻叶枕结构的影响30

2.8OsMYBAS1-3基因突变上调了BR相关基因的表达31

2.9OsMYBAS1-3基因突变对BR敏感性的影响32

i

OsMYBAS1-3转录因子在水稻响应重金属胁迫中的功能研究

2.10OsMYBAS1-3基因突变对水稻产量的影响33

3讨论34

第三章OsMYBAS1-3在响应重金属Cu、Cd胁迫中的功能分析37

1材料与方法37

1.1野生型和突变体的生长差异分析37

1.2叶绿素含量测定37

1.3根尖的质膜完整性分析38

1.4叶片ROS含量的测定38

.-

1.5根中HO和O的组织化学定位38

222

1.6Cu、Cd含量的测定39

1.7数据处理与分析40

2结果与分析40

2.1Cu、Cd处理后，OsMYBAS1-3突变对水稻生长的影响40

2.2Cu、Cd处理后，OsMYBAS1-3突变对水稻叶绿素含量的影响42

2.3Cu、Cd处理后，OsMYBAS1-3突变对水稻根尖质膜完整性的影响43

2.4Cu、Cd处理后，OsMYBAS1-3突变对ROS积累量的影响43

2.5Cu、Cd处理后，OsMYBAS1-3突变对水稻Cu、Cd积累量的影响45

3讨论45

第四章OsMYBAS1-3的转录调控研究47

1材料与方法47

1.1OsMYBAS1-3基因启动子的克隆47

1.2OsMYBAS1-3基因启动子序列分析和功能预测47

1.3GUS转基因水稻的构建47

1.4GUS组织化学染色47

1.5Cu、Cd处理下OsMYBAS1-3