表达非洲猪瘟病毒p72和p54D的重组猪痘病毒的构建与免疫评价.pdf

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摘要I

ABSTRACTIII

本研究目的意义VII

第一篇文献综述1

第一章非洲猪瘟的防控研究进展1

1病原学1

2流行病学1

3非洲猪瘟诊断技术研究进展2

3.1微生物学诊断3

3.2免疫学诊断3

3.3分子生物学诊断4

4非洲猪瘟病毒疫苗研究进展4

4.1灭活和减毒活疫苗5

4.2亚单位疫苗和DNA疫苗6

4.3重组活载体疫苗6

5非洲猪瘟病毒综合防控7

5.1生物安全防控策略7

5.2药物防控策略8

6展望9

参考文献10

第二章猪痘病毒作为疫苗载体的研究进展15

1SPV概述15

2SPV分子病毒学15

3SPV载体的应用16

4展望18

参考文献19

第二篇试验研究21

第三章非洲猪瘟蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备21

1材料与方法22

1.1实验材料22

1.2p72、p54D的原核表达22

1.3多克隆抗体的制备27

2结果28

2.1p72、p54D的原核表达28

2.2多克隆抗体的制备31

3讨论32

4本章小结33

参考文献34

第四章非洲猪瘟重组猪痘病毒活载体疫苗的构建与免疫评价37

1材料与方法37

1.1试验材料38

1.2猪痘病毒滴度测定方法的建立38

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目录

1.3重组猪痘病毒转移载体pUSG11/P28-p72、pUSG11/P28-p54D、

pUSG11/P28-p72-linker-p54D的构建与鉴定39

1.4重组猪痘病毒的rSPV-p72、rSPV-p54D、rSPV-p72-linker-p54D构建与鉴定44

1.5免疫保护实验46

1.6p72p54D46

、特异性抗体检测

1.7细胞因子检测47

2结果47

2.1猪痘病毒滴度绝对定量检测方法的建立47

2.2猪痘病毒的扩增48

2.3重组猪痘病毒转移载体pUSG11/P28-p72、pUSG11/P28-p54D、

pUSG11/P28-p72-linker-p54D的构建与鉴定49

2.4重组病毒滴度检测方法的建立50

2.5重组猪痘病毒rSPV-p72、rSPV-p54D、rSPV-p72-linker-p54D的构建与鉴定50

2.6p54p7253

和特异性抗体检测

2.7细胞因子检测53

3讨论55

4本章小结57

参考文献58

全文总结61

致谢63

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摘要

表达非洲猪瘟病毒p72和p54D的重组猪痘病毒

的构建与免疫评价

摘要

非洲猪