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环境微生物实验(四)MicrobiologyDepartmentCollegeofResourceEnvironmentLiyongTel:023E-mail:培养基的配制和灭菌实验目的实验材料实验方法实验作业实验目的01了解培养基的配制原理和方法,掌握其配制过程。02了解几种灭菌方法,掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的使用方法。03熟悉微生物的有关准备工作及操作方法。实验材料药品:相关配方01器材:高压蒸汽灭菌器02其它:03实验方法培养基的配制过滤:除去杂质。溶化:在搪瓷杯中加入所需水量,玻棒搅匀,加热溶解。选择配方:称量:按照配方正确称取各种原料放于搪瓷杯中。23145灭菌备用:培养基灭菌后必须在370C下恒温培养24h,确定无菌生长,方可使用。包扎成捆,挂上标签,注明何种培养基。调pH值:用NaOH或HCl调pH,用pH试纸对照。分装:注意不要污染棉塞。加琼脂溶化:加热过程要不断搅拌,可适当补水。牛肉膏蛋白胨琼脂培养基牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠3g琼脂24g水1000mLpH7.2~7.4去皮马铃薯200g(煮沸30min后过滤,用汁液)蔗糖20g自来水1000mL琼脂24gpH自然12345马铃薯蔗糖琼脂培养基01蛋白胨:10g02牛肉浸膏:3g03NaCl:5g04乳糖:5g05水:1000ml066%溴甲酚紫乙醇溶液:指示剂07pH:7.208分装试管;10ml/管,内放置倒置小管;单倍乳糖蛋白胨培养液蛋白胨:10g*3牛肉浸膏:3g*3NaCl:5g*3乳糖:5g*3水:1000ml6%溴甲酚紫乙醇溶液:指示剂pH:7.2分装试管;10ml/管,内放置倒置小管;同单倍乳糖蛋白胨培养液;浓度三倍;三倍乳糖蛋白胨培养液伊红美蓝鉴别培养基蛋白胨:10g乳糖:5g琼脂:24gK2HPO4:2g水:1000ml2%伊红:20ml5%美蓝:13ml注意:伊红和美蓝液单独分装灭菌,使用前再和其它成分混合使用;牛肉膏蛋白胨培养基:1000mL1斜面:40支×7mL2其它:分装三角瓶(700ml)31组:马铃薯培养基:500mL2组:装入三角瓶中单倍乳糖发酵培养基:600mL分装至试管60支;三倍乳糖发酵培养基:300mL分装至试管30支;3组:
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