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目录
摘要I
ABSTRACTIII
缩略词表及英汉对照VII
第一章文献综述1
1植物叶形态发育特点1
1.1叶原基的发育2
1.2叶片的极性建成3
2植物复叶发育调控网络4
2.1植物复叶发育重要调控基因4
2.1.1WOX转录因子家族基因4
2.1.2YABBY转录因子家族基因5
2.1.3其他调控复叶发育的重要基因6
2.2氧化还原稳态与复叶发育7
2.3其他植物复叶发育影响因素8
3大豆复叶形态变异与遗传基础研究进展8
3.1大豆复叶形态发育9
3.1.1大豆复叶发育模式9
3.1.2大豆小叶形态建成9
3.2大豆复叶形态变异9
3.2.1大豆复叶小叶数变异10
3.2.2其他叶形态变异11
3.3大豆复叶形态性状遗传与基因发掘11
3.3.1控制叶片形态的基因11
3.3.2控制小叶数的基因12
3.3.3控制叶柄长短的基因12
4大豆叶形态变异发掘与基因功能研究主要方法13
4.1叶形态变异来源途径13
4.2正向遗传学策略14
4.3反向遗传学技术15
4.4基因组、转录组等组学技术应用15
5本研究目的、内容与技术路线16
5.1研究目的16
5.2研究内容与技术路线17
第二章基因敲除多小叶突变体MLW48表型鉴定与靶标基因分析19
1材料与方法19
1.1供试材料19
1.2试验设计20
1.3实验方法20
1.3.1表型鉴定与农艺性状调查20
1.3.2靶标基因鉴定21
1.3.3转录组测序21
1.3.4RNA提取及第一链cDNA合成22
1.3.5实时荧光定量PCR分析22
1.3.6蛋白序列比对和系统发育分析23
1.3.7亚细胞定位分析23
1.3.8酵母双杂实验23
1.3.9荧光素酶互补（LUC）实验24
1.3.10数据统计与分析24
2结果与分析24
2.1多小叶突变体MLW48表型鉴定24
2.2MLW48突变体靶标基因鉴定26
2.2.1突变体植株转基因成分检测26
2.2.2sgRNA序列信息26
2.2.3靶标基因编辑类型检测27
2.2.4脱靶基因预测与检测27
2.3MLW48突变体转录组分析30
2.3.1差异表达基因的筛选30
2.3.2差异基因功能注释31
2.3.3突变体中叶发育相关基因上调表达33
2.3.4生长素相关基因的差异表达分析35
2.4大豆WOX蛋白的生物信息学分析36
2.4.1WOX家族蛋白分子进化分析36
2.4.2GmWOX1A蛋白结构分析38
2.5GmWOX1A的组织表达及其编码蛋白的亚细胞定位分析39
2.6GmWOX1A的互作蛋白分析41
2.6.1酵母双杂实验筛选互作蛋白41
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