RGMb对山羊子宫内膜上皮细胞的作用及机制研究.pdf

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目录

摘要I

ABSTRACTIII

缩略词V

前言VII

第一部分文献综述1

第一章RGMb及其在BMP信号通路中的研究进展1

1.RGM家族组成及其对机体的作用1

1.1RGMa1

1.2RGMb2

1.3RGMc3

1.4RGMd3

2.RGMb在BMP信号通路中的研究进展3

2.1骨形态发生蛋白BMP及其对机体的作用3

2.2RGMb在BMP-MAPK和BMP-Smad通路中的研究进展5

3.子宫内膜的作用6

3.1子宫内膜结构6

3.2子宫内膜上皮细胞功能6

4.本研究的目的与意义7

第二部分试验研究9

第一章RGMb在山羊子宫内膜中的表达及其作用研究9

1材料与方法10

1.1试验设计10

1.2试验样本采集及细胞分离培养11

1.3试验主要试剂与仪器11

1.3.1试验主要试剂11

1.3.2仪器12

1.4方法13

1.4.1免疫组织化学技术13

1.4.2免疫荧光化学13

1.4.3RGMb基因沉默13

1.4.4实时荧光定量PCR14

1.4.5CCK-8细胞活力检测16

1.4.6蛋白质免疫印迹17

1.5统计学分析17

2结果与分析17

2.1RGMb在山羊子宫中的表达定位17

2.2子宫内膜上皮细胞的培养鉴定18

2.2.1形态鉴定18

2.2.2免疫荧光化学鉴定18

2.3RGMb干扰RNA的转染效率鉴定19

2.4RGMb干扰抑制山羊子宫内膜上皮细胞增殖20

2.5RGMb干扰促进山羊子宫内膜上皮细胞凋亡21

2.6RGMb干扰抑制山羊子宫内膜上皮细胞BMP通路成员ERK1/2和

Smad1/5/8的磷酸化22

3.讨论22

3.1RGMb在山羊子宫中的表达定位23

3.2RGMb干扰抑制子宫内膜上皮细胞增殖23

3.3RGMb干扰促进山羊子宫内膜上皮细胞凋亡24

4.小结24

第二章RGMb影响子宫内膜细胞功能的分子机制25

1材料与方法26

1.1试验设计26

1.2试验材料26

1.2.1试剂26

1.2.2仪器27

1.3方法27

1.3.1细胞培养、传代与保存27

1.3.2RGMb基因沉默及过