DB11T 2358-2024 淡水大型底栖无脊椎动物环境DNA监测技术规范.docxVIP

ICS13.020.99

CCSZ06

DB11

北 京 市 地 方 标 准

DB11/T2358—2024

淡水大型底栖无脊椎动物环境DNA监测技术规范

TechnicalspecificationforenvironmentalDNAmonitoringoffreshwaterbenthicmacroinvertebrates

2024-12-25发布 2025-04-01实施

北京市市场监督管理局 发布

DB11/T2358—2024

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I

I

II

II

目 次

前 言 II

范围 1

规范性引用文件 1

术语和定义 1

环境DNA监测原则及流程 2

试剂 3

仪器设备和材料 5

样品 5

分析步骤 6

结果分析 7

质量保证和质量控制 8

废物处置 9

附

附

录

录

A

B

（资料性）

（资料性）

淡水大型底栖无脊椎动物常用扩增引物 10

环境DNA采样记录表 11

附

录

C

（资料性）

沉积物样品采集和前处理 12

附

录

D

（资料性）

淡水大型底栖无脊椎动物环境DNA监测结果记录表 13

参考文献 14

前 言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由北京市生态环境局提出并归口。本文件由北京市生态环境局组织实施。

本文件起草单位：北京市生态环境监测中心、中国科学院生态环境研究中心。

本文件主要起草人：常淼、沈秀娥、孙成华、杜泽瑞、陈圆圆、战爱斌、熊薇、陈义永、马秋月、贺鑫、荆红卫、陶蕾、刘康、任帅、晁晶迪。

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淡水大型底栖无脊椎动物环境DNA监测技术规范

范围

本文件规定了淡水大型底栖无脊椎动物环境DNA监测的监测原则及流程、试剂、仪器设备和材料、监测点位布设、监测频次和时间、样品采集、实验分析、结果分析、质量保证和质量控制等技术要求。

本文件适用于河流、湖泊、水库等淡水水体中大型底栖无脊椎动物环境DNA的监测。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB19489 实验室生物安全通用要求

GB/T30989 高通量基因测序技术规程

GB/T40226 环境微生物宏基因组检测高通量测序法

HJ91.2 地表水环境质量监测技术规范

HJ1295 水生态监测技术指南河流水生生物监测与评价（试行）

HJ1296 水生态监测技术指南湖泊和水库水生生物监测与评价（试行）

DB11/T2023 鱼类贝类环境DNA识别技术规范

术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

淡水大型底栖无脊椎动物freshwaterbenthicmacroinvertebrates

生活史的全部或至少一个时期栖息于内陆淡水水体的水底中且个体不能通过500μm孔径网筛的无

脊椎动物。主要包括刺胞动物门（Cnidaria）或称腔肠动物门（Coelenterata）、扁形动物门

（Platyhelminthes）、线形动物门（Nematomorpha）、线虫动物门（Nematoda）、环节动物门（Annelida）、

软体动物门（Mollusca）、节肢动物门（Arthropoda）的动物。

[来源：HJ710.8—2014，3.1、3.2，有修改]

3.2

环境DNAenvironmentalDNA（eDNA）

从生物生活环境中直接提取到的不同物种DNA的总和，包含生物脱落、释放的细胞或游离的DNA。

[来源：DB11/T2023—2022，3.3，有修改]

3.3

高通量测序high-throughputsequencing（HTS）

区别于传统双脱氧链末端终止法（Sanger）测序，能够一次并行对大量核酸分子进行平行序列测定

的技术。

[来源：GB/T30989—2014，3.19，有修改]

3.4

DNA条形码DNAbarcode

一段标准的、短小的、易于PCR扩增的、物种间有足够变异且物种内相对保守的、能够代表该物种

的基因序列。本文件选用淡水大型底栖无脊椎动物常用的后生动物线粒体基因组上的DNA序列作为目标

序列。

3.5

eDNA宏条形码技术eDNAmetabar