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士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?——《论语》
实验室常用缓冲液配置方案
1)1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)
组份浓度:1MTris-HCl
配制量:1L
配制方法:
1.称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
PH值浓HCl
7.4约70ml
7.6约60ml
8.0约42ml
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,
温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2)10×TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)
组份浓度:100mMTris-HCl,10mMEDTA
配制量:1L
配制方法:
1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。
1MTris-HClBuffer(PH7.4,7.6,8.0)100ml
500mMEDTA(PH8.0)20ml
2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,均匀混合。
3.将溶液定容至1L后,高温高压灭菌。
4.室温保存。
3)1.5MTris-HCl(pH8.8)
组份浓度:1.5MTris-HCl
配制量:1L
配制方法:
1.称量181.7gTris置于1L烧杯中。
2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.用浓盐酸调节pH值至8.8。
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,
温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
4)3M醋酸钠(pH5.2)
学而不知道,与不学同;知而不能行,与不知同。——黄睎
组份浓度:3M醋酸钠
配制量:100ml
配制方法:
1.称量40.8gNaAc·3H2O(或者24.6g无水NaAc)置于100-200ml烧杯中,加入月40ml的
去离子水搅拌溶解
2.加入冰醋酸调节pH值至5.2
3.加去离子水将溶液定容至100ml
4高温高压灭菌后,室温保存。
5)PBSBuffer
组份浓度:137mMNaCl,2.7mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4
配制量:1L
配制方法:
1.称量下列试剂,置于1L烧杯中。
NaCl8g
KCl0.2g
Na2HPO41.42g
KH2PO40.27g
2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.滴加浓盐酸将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1L。
4.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:上述PBSBuffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1
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