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PopW互作蛋白SlVHA-B2和SlCA2功能探析.pdf

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摘要I

ABSTRACTIII

第一章文献综述1

1Harpin蛋白的研究进展1

1.1Harpin的一般特性1

1.2Harpin蛋白在植物上的有益效应1

1.3Harpin蛋白与植物激素的关系3

1.4PopW的研究进展4

2植物中VHA-B2的基因功能5

2.1V-ATPase的结构与分布5

2.2V-ATPase的生物学功能6

2.3影响V-ATPase活性的因素8

2.4V-ATPase亚基B的研究进展9

3CA10

植物中碳酸酐酶的基因功能

3.1CA的作用机制10

3.2CA的分类和定位10

3.3CA的生物学功能11

4本研究的目的和意义12

第二章PopW互作蛋白验证13

1材料与方法13

1.1植物材料13

1.2菌株13

1.3常用培养基与试剂13

1.4载体构建14

1.5Y2H验证蛋白互作20

1.6BiFC验证蛋白互作21

1.7LCA验证蛋白互作22

1.8Co-IP验证蛋白互作22

2结果与分析25

2.1Y2H互作蛋白验证结果25

2.2BiFC互作蛋白验证结果25

2.3LCA互作蛋白验证结果26

PopW互作蛋白SlVHA-B2和SlCA2功能探析

2.4Co-IP互作蛋白验证结果27

2.5PopWV-ATPase27

与其他亚基蛋白互作验证

3讨论28

SlVHA-B2SlCA230

第三章和的功能探析

1材料与方法30

1.1植物材料与培养条件30

1.2菌株30

1.3常用培养基与试剂30

1.4SlVHA-B2在番茄不同组织的表达模式分析30

1.5SlVHA-B2对不同外源激素处理的响应31

1.6SlVHA-B2和SlCA2的亚细胞定位31

1.7SlVHA-B2SlSec13SlCA231

与和的互作验证

1.8BL06粗蛋白和PopW蛋白的提取和浓度计算32

1.9SlVHA-B2SlCA233

番茄和沉默植株的获得

1.10SlVHA-B2番茄沉默植株生长指标检测34

1.11SlVHA-B2沉默植株V-ATPase

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