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本研究由国家重点研发计划任务（2021YFD1800402）资
助
ThisstudywassupportedbyNationalKeyResearchand
DevelopmentProgramofChina(No.2021YFD1800402)
目录
摘要I
ABSTRACTIII
本研究的目的和意义VII
第一篇文献综述1
第一章巴氏链球菌原特性1
1巴氏链球菌病原特征及分类1
1.1巴氏链球菌病原特征1
1.2巴氏链球菌分类1
2巴氏链球菌对动物的致病性2
3巴氏链球菌对人的致病性2
4巴氏链球菌检测方法4
5巴氏链球菌基因组5
6巴氏链球菌动物模型5
7巴氏链球菌耐药特征6
8巴氏链球菌毒力因子6
参考文献7
第二章岩藻糖的生物学功能及其对细菌毒力的影响13
1岩藻糖结构与物化属性13
2哺乳动物中岩藻糖的生物学功能13
2.1概述13
2.2末端岩藻糖基化生物学功能14
2.3核心岩藻糖基化生物学功能14
2.4O-岩藻糖基化生物学功能15
3细菌岩藻糖利用途径及其调控机制15
4岩藻糖对细菌毒力的影响17
参考文献19
第二篇实验研究25
第三章巴氏链球菌多重PCR检测方法的建立及应用25
1材料与方法26
1.1主要试剂与仪器26
菌株及培养条件26
1.3多重PCR引物设计与合成27
1.4细菌全基因组提取27
1.5多重PCR反应体系与退火温度优化27
1.6多重PCR特异性试验28
1.7多重PCR灵敏性试验29
1.8猪扁桃体和淋巴结样品巴氏链球菌和猪链球菌检测29
2结果30
2.1多重PCR最佳反应体系与反应条件30
2.2多重PCR特异性30
2.3多重PCR灵敏性31
2.4猪扁桃体和淋巴结样品巴氏链球菌和猪链球菌检测33
3讨论33
4本章小结34
参考文献35
第四章岩藻糖利用基因簇对巴氏链球菌毒力的影响39
1材料与方法40
1.1主要试剂与仪器40
1.2菌株及培养条件40
1.3细菌总RNA提取40
1.4岩藻糖利用基因簇验证41
1.5岩藻糖利用44
1.6不同培养条件下岩藻糖利用基因簇表达水平44
1.7缺失株∆fcsR和∆fcsK的构建45
1.8小鼠毒力试验46
1.9数据统计分析46
2结果47
2.1岩藻糖利用基因簇验证47
2.2WUSP067对岩藻糖的利用48
2.3单碳源条件下岩藻糖利用基因簇表达变化49
2.4ΔfcsR和ΔfcsK有痕缺失株的构建和鉴定51
2.5fcsR对岩藻糖利用基因簇的调控52
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