1.2.2 微生物的选择培养和计数（2课时） 课件 人教版生物选择性必修3.pptx

第1章发酵工程第2节微生物的培养技术及应用1.2.2微生物的选择培养和计数

启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。PCR技术是一种常用的DNA扩增技术，此项技术的自动化，需要使用耐高温的DNA聚合酶，如果请你来找这种耐高温的酶，你会去哪里找？热泉70-80摄氏度的高温条件淘汰了绝大多数微生物，而耐热的水生栖热菌脱颖而出。2美国黄石国家公园的一个热泉一、选择培养基

耐寒微生物石油分解菌被石油污染的土壤冰川冻土层实验室中，人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长，从而筛选特定的微生物。培养基可分离固氮微生物；培养基中可培养自养型微生物。无氮源不加入有机碳源一、选择培养基

在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。1.定义一、选择培养基培养基中加氨苄青霉素具有抗氨苄青霉素能力的菌落长出各种各样的细菌培养基+氨苄青霉素没有抗氨苄青霉素能力的菌落被淘汰怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌?培养基

怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？应该设置基础培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）或完全培养基作为对照，若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌多于该选择培养基，则该选择培养基具有选择性。基础培养基选择培养基那么如果让你分离土壤中分解尿素的细菌，你应该怎么设计呢？

尿素的立体结构尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶。CO(NH2)2脲酶+H2O+CO22NH3在选择培养基中，以尿素作为唯一氮源，只有能合成脲酶的细菌才能生长发育繁殖。1.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？除以尿素作为唯一氮源外，该培养基的其他营养成分与普通培养基基本相同。选择培养基配方的设计讨论

配方：葡萄糖10.0g尿素1.0gKH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g琼脂15.0g蒸馏水1000ml碳源氮源①提供无机盐；②作为缓冲物质调节pH。凝固剂选择培养基配方的设计

1.从物理性质来讲，两者属于_____培养基，判断依据是_________________________________；该类培养基的主要用途为_____________________；2.从用途上来讲，培养基二属于______培养基，目的是为了获得_____________________；3.两种培养基共有的培养基成分有：________________________；培养基一的碳源主要为________，主要氮源为________；培养基二的碳源主要为________，主要氮源为________。培养基一牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g琼脂20.0g蒸馏水定容到1000ml培养基二KH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素CO(NH2)21.0g琼脂15.0g蒸馏水定容到1000ml固体添加了凝固剂琼脂分离、鉴定、计数选择能分解尿素的微生物碳源、氮源、无机盐、水牛肉膏蛋白胨葡萄糖尿素学以致用

（一）方法:（二）基本操作:A、梯度稀释菌液B、涂布平板将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。稀释的原因：稀释度足够高时，能在培养基表面形成单个菌落。要对土壤进行充分稀释，然后再将菌液涂布到制备好的选择培养基上。(2)由于土壤细菌的数量庞大，那么怎么获得要想得到特定微生物的纯培养物呢？二、微生物的选择培养(1)1g土壤中有多少能分解尿素的细菌？计数：测定分解尿素的细菌的数量分离：获得分解尿素的细菌的纯培养物稀释涂布平板法稀释涂布平板法平板划线法

二、微生物的选择培养（三）操作步骤:1.土壤取样：从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。注：取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌

2.样品的稀释（梯度稀释菌液）1×101mL1mL1mL1mL1mL1mL1×1021×1031×1041×1051×1061×1079mL无菌水90mL无菌水10g②将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，制成菌液。取1mL上清液加入