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正交法测几种因素对酶活力的影响

一、实验原理

1、酶反应受到多种因素的影响，如底物浓度、酶浓度、温度、pH值、激活剂和

抑制剂等都能影响酶反应速度，并且各因素之间也相互影响（交互作用）。

1）底物浓度对酶反应速度的影响

2）酶浓度对酶反应速度的影响

3）温度对酶反应速度的影响

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最适温度不是一个固定

的常数，它受底物的种类、

浓度；溶液的离子强度、

pH、反应时间等的影响。

4）pH对酶反应速度的影响

最适pH和最适温度一样，也不

是一个固定的常数，

2、正交法

1）正交法是利用正交表来安排多因素试验、寻求最优水平组合的一种高效率试

验设计方法。它从多因素试验的全部水平组合中挑选部分有代表性的水平组合进

行试验，通过对这部分试验结果的分析了解全面试验的情况，找出最优水平组合。

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2）正交法的优点：用较少的试验获得较全面的数据结果，避免了在多因素、多

水平试验中对每个因素的每个水平都互相搭配进行的全面试验，节省大量的人力、

物力，缩短了实验时间。

3）正交表的正交性：

Ⅰ表中每一列（因素）各水平的重复数相等；

Ⅱ表中任意两列横向形成的有序数对中，所有各种可能的有序数对的重复数相同。

用正交表安排的实验，具有均衡分散的特点。即按正交表挑选出来的各因素

水平组合在全部水平组合中的分布式均衡的。

4）正交实验的一般流程

Ⅰ列出试验中的因素和水平数

Ⅱ选择合适的正交表

Ⅲ根据正交表进行实验设计

Ⅳ实验并收集数据

Ⅴ分析数据，得出结论

5）结果分析

Ⅰ利用各因素同一水平试验指标之和及平均数，可比较因素不同水平对试验的影

响程度。

Ⅱ计算极差，可比较不同因素的影响程度。

Ⅲ找出最佳试验条件（理论值）。

3、本实验选取四个因素，即底物浓度[S]、酶浓度[E]、温度、pH值，每个因

素选三个水平，选择正交表设计实验，实验设计如下表：

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表1

因素12