PbX8_PDCB16介导的胼胝质沉积在梨果实木质素合成中的机制研究.pdf

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摘要I

ABSTRACTIII

缩略词表VII

第一章文献综述1

1梨果实中石细胞与木质素的研究进展1

1.1石细胞对梨果实品质的影响1

1.2石细胞与木质素的关系1

1.3木质素合成研究进展2

2胞间连丝与胼胝质4

2.1胼胝质合成相关研究进展4

2.1.1胼胝质合成相关基因的研究进展4

2.1.2胼胝质在植物生长发育中的作用4

2.2PD研究进展及在物质运输中的作用5

2.2.1PD的结构和调节5

2.2.2PD的运输功能6

2.3胼胝质与PD的关系6

3次生细胞壁与PD6

4研究目的和意义7

第二章PbX8/PDCBs基因鉴定及生物信息学分析9

1材料与方法10

1.1试验材料10

1.2生物信息学分析10

1.2.1家族成员鉴定10

1.2.2系统进化关系分析10

1.2.3结构分析、保守结构域分析10

1.2.4染色体位置基因结构和共线性分析10

1.2.5基因表达分析11

1.2.6启动子顺式作用元件分析11

1.3木质素含量的测定11

i

PbX8/PDCB16介导的胼胝质的沉积在梨果实木质素合成中的机制研究

1.4不同发育时期梨果肉RNA的提取11

1.4.1梨果肉RNA的提取与第一链cDNA的合成11

1.4.2第一链cDNA的合成12

1.4.3qRT-PCR12

1.5蛋白结构分析13

2结果分析14

2.1中国白梨中X8/PDCBs基因的鉴定与分类14

2.2PbX8/PDCBs基因的保守基序和基因结构分析14

2.3PbX8/PDCBs的染色体共线性和Ka/ks分析15

2.4梨果实发育过程中木质素含量的变化17

2.5PbX8/PDCBs启动子顺式作用元件分析17

2.6PbX8/PDCBs在梨果实不同发育阶段的表达模式19

2.7PbX8/PDCB16的蛋白结构分析20

3讨论21

第三章PbX8/PDCB16基因克隆与功能验证23

1材料方法24

1.1试验材料24

1.2表达载体的构建24

1.2.1基因克隆24

1.2.2载体构建25

1.2.3大肠杆菌DH5α转化25

1.2.4菌落/菌液PCR预检测26

1.2.5菌液保种与质粒提取26

1.2.6农杆菌转化液26

1.3亚细胞