RNA甲基化修饰在动物脂肪性肝炎和肝纤维化进程中的作用与机制研究.pdf

本研究由国家重点研发计划（2016YFD0500502），

国家自然科学基金）资助

ThisstudywassupportedbytheNationalKey

ResearchandDevelopmentProject

(2016YFD0500502),theNaturalScienceFoundation

ofChina

目录

摘要I

ABSTRACTVII

缩略语中英文对照XV

本研究目的意义XVII

第一篇文献综述1

第一章Kupffer细胞在脂肪性肝炎发生过程中的作用与机制1

1代谢性肝炎的流行病学及发病机制1

1.1代谢性肝炎的流行病学1

1.2代谢性肝炎的发病机制2

2肝脏Kupffer细胞及其活化机制3

2.1肝脏Kupffer细胞的来源、功能和极化3

2.2代谢性肝炎过程中Kupffer细胞激活的原因4

2.3Kupffer细胞活化的信号转导机制5

3本章小结7

参考文献9

第二章肝星状细胞在肝纤维化进程中的作用与机制15

1肝纤维化的细胞及分子机制15

1.1肝纤维化的定义和发病机制15

1.2细胞外基质的组成及其生物学功能16

1.3激活HSC的细胞因子及HSC活化过程17

2HSC的生物学功能及其在肝纤维化中激活的机制18

2.1HSC的生物学功能19

2.2肝纤维化中HSC激活的信号通路20

2.3肝纤维化中HSC激活与代谢重编程23

3本章小结24

参考文献25

第三章m6A修饰在肝脏疾病中的作用与机制35

修饰的定义及其相关蛋白35

6

1.1mA修饰的定义35

6A修饰的写入、擦除和阅读蛋白36

1.2m

6

1.3mA修饰相关蛋白的转录调控机制40

2m6A修饰介导的生物学功能42

6

2.1mA修饰调节机体生殖和生长发育过程42

2.2m6A修饰调节细胞转分化43

6

2.3mA修饰调节机体免疫和炎症反应43

6

2.4mA修饰响应机体应激反应45

3m6A修饰调控肝脏疾病45

3.1m6A修饰调控肝细胞脂质沉积和脂肪肝45

3.2m6A修饰参与肝细胞癌的发生发展46

4本章小结48

参考文献49

第二篇研究内容59

第四章m6A修饰在蛋鸡脂肪肝综合征中的作用与机制研究59

1材料与方法60

1.1实验动物饲养及实验设计60

1.2肝脏切片油红染色61

1.3肝脏甘油三酯含量测定62

1.4血浆皮质酮含量测定62

1.5肝脏总RNA提取和反转录62

1.6荧光相对定量PCR（RT-PCR）62

1.7肝脏蛋白提取和蛋白免疫印迹（Westernblot）实验64

6

1.8RNAmADotblot分析65

6

1.9mRNA特定位点mA修饰水平的SELECT检测65

1.10染色质免疫沉淀（ChIP）67

1.11数据分析及统计68

2实验结果69

2.1HELP日粮饲喂导致蛋鸡肝脏脂质过度沉积69