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13-6动物性别控制所谓性别控制,就是通过人为干预或操作手段使母畜繁殖所需要的后代。多数动物的性别是由性染色体决定的。以人为例:XX——女;XY——男在人Y染色体短臂发现了一个单拷贝基因,称为Y染色体性别决定区基因(SexdeterminingregionYgene,SRY)Y染色体短臂上一段SRY基因决定人的性别。SRY基因启动雄性器官的发育。XX染色体缺少SRY基因,染色体上DSS位点基因转录促进卵巢发育,形成雌性。性别决定机制性别控制途径1-受精前性别控制:选择X、Y精子性别控制主要有两条途径:选择相应的X或Y雄性配子,进行体外受精,就可以实现性别控制。2-胚胎移植前性别控制:在移植前对胚胎进行性别鉴定,然后对所需要性别的胚胎进行移植,从而达到控制后代性别的目的,这是动物性别控制较为实用的方法。第四代试管婴儿借助别人卵浆增强自己卵子活力01特征:卵浆置换02主要针对那些卵子质量不高、活力差的03高龄女性04超数排卵?在月经周期第3-9d时,利用促性腺激hMG或CC药物素处理,使得卵巢中有更多的卵泡发育,更多的卵被排出,这个过程就称为超数排卵(superovulation)?意义:让每个供体提供更多的胚胎视频学习网站体外受精30/151244.shtml试管婴儿试管婴儿制作流程(1)ht(2)(3)(4)(5)13-4核移植动物一定义细胞核移植(Cellnucleartransfer)是利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。细胞核移植动物:是用特定发育阶段的核供体及相应的核受体(去核的卵子)体外构建重组胚,通过胚胎移植达到受体,发育出生的动物。理论基础:动物细胞核具有发育成个体的全能性,因此克隆动物可以通过细胞核移植实现。但是,细胞核移植所得到的动物为核质杂种。克隆动物一般指采用核移植、胚胎移植技术得到的动物。1-核供体细胞的获得与取核2-受体细胞的去核3-细胞核移植4-重组胚的激活、培养和移植5-核移植后代的鉴定核移植动物培育技术流程1核供体细胞获得与取核01供核细胞可以是动物原代细胞或传代细胞。分离制备单个动物细胞,体外培养得到正常二倍体体细胞系,然后进行1~5天的缺血饥饿培养,诱020304使细胞处于“静止”状态(一般进入G0期)。采用细胞松弛素B(CytochalasinB)诱发细胞排核或者显微操作取核等方法得到细胞核。05062受体细胞去核(1)盲吸去核法:用微细玻璃管吸除处于MII分裂中期的卵细胞染色体及周围的部分细胞质。用荧光染料Hoechst33342对卵细胞DNA进行染色,在紫外观察下去核可提高去核成功率。(2)功能性去核法:使用Hoechst33342与卵细胞DNA结合后,用紫外线或激光定点照射使核功能丧失。(3)化学诱导去核法:使用脱羰秋水仙素处理卵细胞,迫使核染色质全部进入第二极体细胞。细胞核移植可以采用胞质内注射和透明带下注射方法。细胞核移植前者是用微吸管吸取供体核后,直接注射进卵子细胞质。后者是把细胞核注射进透明带和卵细胞间的卵周隙中。核移植方法将受体卵细胞去核移植后的细胞激活后可以象受精卵一样发育形成动物个体,并具有与核供 体细胞相同的基因向去核卵细胞植入供体细胞核核移植与动物克隆4重组胚激活正常受精卵的发育启动和早期卵裂主要由卵母细胞胞质中母源信息所控制,成熟的卵母细胞质能使移入的细胞核在形态上和功能上发生变化,从而导致供核回复到初始状态,基因从头开始顺序表达。而核移植重组胚的发育需要进一步激活,可以采用电激活和化学激活方法。(1)电激活:是可把重组胚放在电融合槽两极之间,用几次瞬时直流脉冲刺激使其激活。(2)化学激活:常用的激活剂包括7%乙醇、SrCl2、放线菌酮、离子霉素等。锶5重组胚培养和移植激活后的重组胚可以采用体内和体外两种培养方式。(1)体内培养:是将重组胚移植入同种或异种受体动物的输卵管发育至桑葚胚或囊胚期(8-16cell),再进行胚胎移植至受体动物子宫发育。(2)体外培养:是将重组胚在特定培养液中培养至囊胚,选择优质胚胎移入同种的同期发情的受体动物中继续发育。6体细胞核移植后代的鉴定与出生对于体细胞核移植培育的动物,可以从形态性别上鉴定,还可以采用分子生物学技术鉴定。三胚胎细胞克隆动物体细胞克隆动物体细胞克隆:是将动物体细胞经过抑制培养使其处于休眠状态,利用细胞核移植技术将其导入去核卵母细胞,培育成早期胚胎,将
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