BJS 202410粉丝中植物源性成分的测定.pdf

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食品补充检验方法

BJS202410

粉丝中植物源性成分的测定

2024-12-22发布

国家市场监督管理总局发布

BJS202410

粉丝中植物源性成分的测定

1范围

本方法规定了粉丝、绿豆、豌豆、玉米、马、木测的实时荧光PCR方法

中红薯铃薯薯源性成分检

本方法适用于粉丝中红薯、绿豆、豌豆、玉米、马铃薯、木薯源性成分的定性检测。

2原

提取样品DNA,通过特异性引物探针进行植物源性成分的实时荧光PCR扩增，根据PCR扩增反

应中产物荧光信号及扩增曲线判定，实现对样品植物源性成分的定性分析。

3试剂和材料

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水

3.1试剂

3.1.1a-淀粉酶（1500U/mg〜3000U/mg,U为酶活力单位）。

3.1.2氯化钠（NaCl）。

3.1.3十二烷基硫酸钠（SDSCzHzOQa）。

5s

3.1.4三羟甲基氨基甲烷（Tris,QHnNC»3）。

3.1.5乙二胺四乙酸二钠（EDTA,H14N2O8）。

Na?CloNa2

3.1.6（HC1,

盐酸体积分数37%）。

3.1.7氢氧化钠（NaOH）。

3.1.8蛋白酶K（20mg/mL,—20保存）。

3.1.9核糖核酸酶A（RNA酶A）。

3.1.10co

乙酸钾（CHOK）。

3

3.1.11乙酸（CHOH）。

3co

3.1.12聚乙二醇20000。

3.1.13无水乙醇（QHsOH）。

3.1.14羟基磁珠（粒径500nm,50mg/mL）。

3.1.15PCR反应预混液（2X）（DNA聚合酶1U〜2U,荧光PCR缓MgSO“2.5〜

冲液，mmol/L

4.0mmol/L,dNTP0.25，也可选的荧光PCR反应预混液。

mmol/L）用商业

3.2试剂配制

3.2.1厂10mg1.1）,1mL不可

淀粉酶溶液（10称取a-淀粉酶（3.溶解于无菌水中。高压灭

mg/mL）：

菌，分装成数管后于一20保存，避免反复冻融。

3.2.2RNA酶A溶液（10称取10mg无DNA酶的RNA酶A（3.1.9）,溶解于1mL无菌水

mg/mL）：

中，在100沸水中温浴15min〜20min,冷却至室温后，分装成数管后于一20保存，避免反复冻融。

3.2.3氢氧化钠溶液在160mL水中加入80.0g氢氧化钠7）,溶解后，冷

（10mol/L）：