栀子异戊烯基焦磷酸异构酶ippi基因克隆与原核表达.docx

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2025-01-11 发布于河北
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栀子异戊烯基焦磷酸异构酶IPPI基因克隆与原核表达

【摘要】目的克隆栀子环烯醚萜生物合成途径中异戊烯基焦磷酸异构酶GjIPPI基因，并对其进行原核表达。方

法以栀子成熟果实中提取的总RNA为模板，通过反转录、DNA回收、载体构建等技术对异戊烯基焦磷酸异构酶

（isopentenyldiphosphateisomerase）cDNA进行克隆。将该基因片段与pLB零背景载体相连接，构建重组质粒，再将重组质粒进行双酶切，与双酶切过的载体pMAL-c5X相连接，构成重组质粒，再转化大肠杆菌表达菌株后进行诱导目的蛋白。通过采用变性聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS)的方法来检测蛋白的表达情况。结果