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单克隆抗体与基因工程抗体多克隆抗体
(Polyclonalantibody)一.概念给动物接种抗原所获得的免疫血清或抗血清是多种抗体的混合物,它是由多种抗原决定簇刺激多株B细胞增殖分化所产生的,称为多克隆抗体.二.多克隆抗体的应用免疫学检测被动免疫治疗和紧急预防三.存在问题特异性差,用于免疫学检测容易出现交叉反应单克隆抗体
(Monoclonalantibody,McAb)12通过B细胞杂交瘤技术,获得特异性针对某一种抗原决定簇的细胞克隆，产生均一性的抗体.概念:小鼠-小鼠大鼠-大鼠小鼠-人人-人B细胞杂交瘤的类型.杂交瘤技术的原理01亲本细胞的选择02小鼠骨髓瘤细胞03次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核苷转移酶04(HGPRT)缺陷型05免疫脾细胞06经抗原免疫的BALB/c小鼠的脾脏07细胞融合01骨髓瘤细胞02PEG03杂交瘤细胞04脾细胞05融合后细胞的类型:06未融合的脾细胞07杂交瘤细胞08未融合的瘤细胞093杂交瘤细胞的选择性培养DNA合成的途径：糖+氨基酸氨基喋呤(Aminopterin,A)TK核苷酸DNA胸腺嘧啶核苷TMP(Thymidine,T)核苷酸前体次黄嘌呤HGPRTIMP(Hypoxanthine,H)融合后细胞在HAT培养基中存活情况脾细胞（HGPRT+,TK+,不能长期生长）骨髓瘤细胞（HGPRT-,TK-，不能生长）杂交瘤细胞（HGPRT+,TK+，能够生长）杂交瘤细胞的筛选和克隆化筛选：免疫荧光ELISA等克隆化：有限稀释法单个细胞显微操作法软琼脂培养法单克隆抗体的生产体内：BALB/c小鼠体内诱发含有单抗的腹水体外：无血清培养基悬浮培养等单克隆抗体的纯化硫酸铵沉淀法离子交换层析A蛋白-Sepharose亲和层析单克隆抗体的特性01高度均一性：02纯度很高的均一性抗体03高度专一性：04只对抗原分子上某一抗原决定05簇起反应06大量产生及稳定性：07杂交瘤细胞能在体内外无限繁殖08之传代09五.单克隆抗体在医学上的应用用作诊断试剂检测淋巴细胞表面分子，区分不同分化阶段的淋巴细胞，鉴别淋巴细胞。鉴定病原体，准确诊断传染病。用于肿瘤的诊断和分型激素类单抗用于测定体内激素含量，判断内分泌的功能状态纯化抗原分析和探查抗原结构分析抗原决定簇分子的功能用于疾病的治疗抗细胞表面分子单抗，用于移植排斥反应的防治抗细胞因子单抗用于自身免疫性疾病的治疗抗肿瘤单抗用于肿瘤的导向治疗123456用作研究工具鼠源性单抗用于人体，导致异源性超敏反应异种抗体反应由于肿瘤特异性抗原较少，缺乏对肿瘤有严格特异性的单抗，对正常组织有交叉反应单克隆抗体的特异性单克隆抗体用于免疫治疗存在的问题概念：根据研究者的意图，采用基因工程方法，在基因水平，对免疫球蛋白基因进行切割、拼接或修饰后导入受体细胞进行表达，产生新型抗体。主要包括嵌合抗体、单链抗体、人源化抗体、双价抗体和双特异性抗体。基因工程抗体
(Geneticengineeringantibody)
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