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食品补充检验方法

BJS202005

畜肉及内脏中异丙嗪的测定

2020-11-19发布

国家市场监督管理总局发布

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畜肉及内脏中异丙嗪的测定

1范围

本方法规定了畜肉及内脏中异丙嗪残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。本方法适用于猪、牛、羊肌肉组织及内脏中异丙嗪的定性确证和定量测定。

2原理

用酸化乙腈提取畜类肌肉组织和内脏中的异丙嗪，提取液经涡漩、超声、离心、净化后用液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。

3试剂和材料

除另有规定外，本方法中所用试剂均为分析纯，水应为符合GB/T6682规定的一级水。3.1试剂

3.1.1甲醇(CH3OH)：色谱纯。

3.1.2乙腈(CH3CN)：色谱纯。

3.1.3甲酸(HCOOH)：色谱纯。

3.1.4无水乙醚(C4H10O)。

3.1.5异丙醇(C3H8O)。

3.1.6乙腈(CH3CN)。3.2试剂的配制

3.2.1酸化乙腈溶液(0.1+99.9)（体积比）：移取甲酸(3.1.3)1mL,加乙腈(3.1.6)稀释至1000mL,

混匀。

3.2.2甲酸溶液(0.1+99.9)（体积比）：移取甲酸(3.1.3)1mL,加水稀释至1000mL,混匀。

3.2.3甲醇甲酸溶液(5+95)（体积比）：移取甲醇(3.1.1)5mL,加甲酸溶液(3.2.2)95mL,定容100mL,混匀。

3.3标准品

盐酸异丙嗪标准品的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量及结构式参见附录A中

表A.1,纯度≥98%。

3.4标准溶液的配制

3.4.1标准储备液(100μg/mL)：准确称取标准品(3.3),折算成异丙嗪10mg（精确至0.0001g),置于25mL烧杯中，用适量的甲醇(3.1.1)溶解，转移至100mL容量瓶中，并用甲醇定容，摇匀，配制成质量浓度为100μg/mL标准储备液。置-18℃以下冰箱中保存，有效期6个月。

3.4.2标准中间液(1.00μg/mL)：移取标准储备液(3.4.1)1.00mL,置100mL容量瓶中，用甲醇

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(3.1.1)定容，摇匀，配制成质量浓度为1.00μg/mL标准中间液。置于-18℃保存，有效期3个月。

3.4.3标准工作液(100ng/mL)：移取标准中间液(3.4.2)10.00mL,置100mL容量瓶中，用甲醇(3.1.1)定容，摇匀，配制成质量浓度为100ng/mL标准工作液。置于-18℃保存，有效期1个月。

3.5材料

3.5.1SPE小柱：OasisHLB柱，60mg/3mL,或性能相当者。

3.5.2滤器：0.22μm滤膜。

4仪器和设备

4.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源(ESI)。4.2超声波清洗器。

4.3高速冷冻离心机：转速≥10000r/min。

4.4旋转蒸发仪。

4.5固相萃取装置。4.6涡漩混合器。

4.7氮气吹干仪。

4.8电子天平：感量分别为0.01g和0.0001g。

4.9组织研磨仪。5测定步骤

5.1试样的制备与保存

取供试肌肉或内脏组织，研磨、混匀得到试样，-18℃以下保存。

5.2试样的处理5.2.1提取

称取试样2g（精确至0.01g)于50mL离心管中，加入酸化乙腈溶液(3.2.1)10mL,加盖后涡漩2min,超声提取15min,4℃以下10000r/min离心5min,上清液倒入鸡心瓶中。残渣中再加入酸化乙腈溶液(3.2.1)10mL,重复提取一次，合并上清液，加5mL异丙醇(3.1.5)于鸡心瓶中，40℃减压旋蒸至近干，加5mL水复溶，3mL无水乙醚(3.1.4),除脂，涡漩，弃去上层有机溶液，待净化。

5.2.2