食品中酸性大红GR的测定.docx

食品补充检验方法

BJS202107

食品中酸性大红GR的测定

2021-07-28发布

国家市场监督管理总局发布

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食品中酸性大红GR的测定

1范围

本方法规定了食品中酸性大红GR含量的高效液相色谱测定方法。

本方法适用于水产干制品、辣椒制品和饮料中酸性大红GR含量的测定。2原理

用乙醇氨水溶液提取样品中的酸性大红GR,利用聚酰胺吸附法进行净化，用反相液相色谱仪进行分析。根据保留时间定性，以峰面积外标法定量。

3试剂和材料

注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。3.1试剂

3.1.1无水乙醇(C2H5OH)。

3.1.2石油醚：沸程30℃~60℃。

3.1.3乙酸铵(CH3COONH4)：色谱纯。

3.1.4氨水(NH3·H2O)：含量（质量分数）20%~25%。

3.1.5甲醇(CH3OH)：色谱纯。

3.1.6甲酸(HCOOH)。

3.1.7柠檬酸(C6H8O7·H2O)。

3.1.8乙酸(CH3COOH)。3.2试剂配制

3.2.110mmol/L乙酸铵溶液：称取0.77g乙酸铵加水溶解至1L,经0.22μm微孔滤膜过滤。

3.2.2无水乙醇-氨水-水溶液(7∶2∶1,体积比）：量取无水乙醇70mL,氨水20mL,水10mL,混匀。

3.2.3甲醇-甲酸溶液(6∶4,体积比）：量取甲醇60mL,甲酸40mL,混匀。

3.2.4200g/L柠檬酸溶液：称取20g柠檬酸，加水至100mL,溶解混匀。

3.2.5甲醇-氨水溶液(9∶1,体积比）：量取甲醇90mL,氨水10mL,混匀。

3.2.6甲醇-水溶液(6∶4,体积比）：量取甲醇60mL,水40mL,混匀。

3.2.7pH4的水：水加柠檬酸溶液调pH到4。

3.3标准品

酸性大红GR(C22H14N4Na2O7S2,CAS号：5413-75-2,相对分子质量556.48),纯度≥98.0%,或采

用经过国家认证并授予标准物质证书的标准物质。3.4标准溶液配制

3.4.1酸性大红GR标准储备液(1.0mg/mL)：准确称取按其纯度折算后为100%的酸性大红GR标准

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品0.1g（精确至0.1mg),置100mL容量瓶中，用水溶解并定容，配成1.0mg/mL的标准储备液。贮存于4℃冰箱中，有效期6个月。

3.4.2酸性大红GR标准工作液：吸取1mL标准储备液于10mL容量瓶中，用水稀释成质量浓度为100μg/mL的标准工作液。用甲醇-水溶液(3.2.6)将标准工作液配制成0.2μg/mL、0.5μg/mL、

1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、50.0μg/mL的标准系列工作溶液。临用时配制。

3.5材料

3.5.1聚酰胺吸附型固相萃取柱(500mg/6mL)。

3.5.2聚酰胺粉（尼龙6)：粒径74μm~149μm(100目~200目）。3.5.3pH试纸：测量范围1~14。

3.5.4微孔滤膜：0.22μm,聚四氟乙烯(PTFE)型。

4仪器和设备

4.1高效液相色谱仪：配有二极管阵列或紫外检测器。

4.2分析天平：感量分别为0.001g和0.0001g。

4.3离心机：转速≥8000r/min。

4.4氮吹仪。

4.5固相萃取装置。

4.6漏斗：G3垂融漏斗。

5分析步骤

5.1试样制备和保存

取500g试样或所有试样（试样低于500g时）充分均质、混匀后粉碎，含二氧化碳的饮料类样品通过加热或超声去除二氧化碳。制备好的试样于4℃冰箱保存。

5.2试样前处理

5.2.1辣椒制品和水产干制品：准确称取制备好的试样2.0g（精确至0.001g)于50mL离心管中