天然药物活性成分研究.pptVIP

预处理：水浸泡（溶胀）酸碱处理（洗去杂质）水洗至中性01装柱02上样与洗脱03再生04操作01目前是研究成分不明的天然产物的最常用方法。02选择3~4种不同极性的溶剂，由低极性到高极性分步对粗提物进行分离。03手续复杂、对化学性质不稳定，容易引起分解、异构化的产物应特别注意。系统溶剂分离法STEP2STEP1基础知识原理分配系数与分离因子萃取方法两相溶剂萃取法利用混合物中各成分在两种互不混溶的溶剂中分配系数不同而达到分离的目的。原理分配系数（K）K=C有机相/C水相分离因子（β）β=KA/KB分配系数与分离因子基础知识1假设KA=10，KB=0.1，则β=1003当10β≤100，需萃取10~12次；2当β≥100时，一次简单的萃取就可以完成分离；4当β≤2时，需要完成100次以上的萃取；5当β≈1时，理论上无法完成萃取分离的目的。STEP5STEP4STEP3STEP2STEP1简单萃取法（掌握）pH梯度萃取法（重点掌握）（补充）逆流连续萃取法（了解）逆流分溶法（countercurrentdistributionCCD)（了解）液滴逆流分配法（dropletcountercurrentchromatogrophyDCCC）（了解）萃取方法01020304适用于分离因子较大的情况的分离。提取液的密度最好在1.1~1.2。“等量多次”原则（掌握）乳化现象（熟悉）简单萃取法等量多次原则证明设Vml水中含有Wg溶质，用Sml有机溶剂萃取后，在水中尚有W1g溶质没有被萃取出来，则分配系数KD为：整理得第2次再用Sml有机溶剂萃取水中的溶质后仍有W2g没有被萃取出来，则因此，若每次用Sml有机溶剂萃取，最后剩在Vml水中的溶质Wn为若一次用nSml有机溶剂萃取，剩余在水中的溶质结论用总量相同的溶剂，分多次萃取的效率要比1次萃取的效率高。3241产生原因振摇；少量轻质的沉淀等。天然产物中含有皂苷、蛋白质、植物胶质、鞣质等表面活性物质；两相互不相溶的溶剂；乳化现象解决方案较长时间静置；将乳状液分出，再换新溶剂萃取；将乳状液加温或冷冻；将乳状液抽滤；加入少量电解质（如NaCl等）；加入少量低级醇（如乙醇、戊醇等）。是分离酸性、碱性、两性有机化合物常用的手段。原理：由于溶剂系统PH的改变，改变了化合物的存在状态（游离型或解离型），从而改变了化合物在溶剂系统中的分配系数。酸性化合物：pH=pka-2游离；pH=pka+2解离。碱性化合物相反。pH梯度萃取法以酸性化合物HA为例酸性化合物在水中电离：电离常数取负对数逆流连续萃取法操作简便；萃取完全，不易乳化；适合于两相互不混溶的溶剂的密度相差较大的系统的分离。逆流分溶法（CCD)注意：溶质浓度越低分离效果越好。特点：条件温和，样品易于回收。适用于性质相似的异构体或同系物的分离。液滴逆流分配法（DCCC）CCD的改进方法，不易乳化。需要动力泵。特别适用于皂苷类化合物的分离。可以分为酸碱沉淀、试剂沉淀、铅盐沉淀。酸碱沉淀：适用于酸性、碱性物质的分离。试剂沉淀沉淀试剂沉淀有机溶剂沉淀铅盐沉淀中性醋酸铅碱性醋酸铅沉淀法选择适宜吸附剂（如硅胶、Al2O3、活性炭）去除杂质或选择性筛选目标成分。如用活性炭去除在提取液中的叶绿素等脂溶性成分。吸附法（补充）在水提液中加入NaCl、MgCl2等无机盐促进极性稍大组分析出的方法。如盐酸小檗碱易溶于热水，在冷水中溶解度小，但在结晶冷却过程中不易析出结晶，可通过加入NaCl固体的方法促进析晶。盐析法（补充）透析法色谱法吸附色谱(adsorptionchromatography)分配色谱/液相色谱(patitionchr.)离子交换色谱(ionexchangechr.)大孔吸附树脂法(macro-reticularresinemethod)凝胶色谱法(gelfiltrationchr.)气相色谱法(gaschromatography)高效液相色谱（highperformanceliquidchromatography)基本原理：利用混合物中不同组分分子、溶剂分子与吸附剂表面分子间的作用力不同，引起不同的吸附性能而进行分离。01吸附剂02色谱结果03操作方式04吸附色谱极性吸附剂：硅胶、氧化铝吸附剂非极性吸附剂：活性炭聚酰胺01硅胶：微酸性，不宜直接用于碱性物质的