2025年高二生物寒假衔接讲练（人教版）第02讲 微生物的培养技术及应用（原卷版）.pdf

第02讲微生物的培养技术及应用

【学习目标】

1.学会如何配置培养基，明确培养基的成分及分类；掌握无菌技术中消毒与灭菌的运用；熟悉微生物酵母菌

的纯培养过程。

2.通过对灭菌技术及实验步骤的学习，辨认实验器具，提高实验操作能力。

3.通过学习微生物的基本培养技术，了解微生物的培养条件，更加透彻地理解生物实验，从而喜欢上这门学

科。

4.学会如何配置选择培养基；掌握稀释涂布平板法的操作细节；熟悉土壤中分解尿素的细菌的分离计数过程。

5.学会操作涂布器分离细菌；理解对细菌计数的算法。

6.通过学习微生物的选择培养和数量测定，了解生物科研工作的价值和意义。

【基础知识】

一、培养基

1．培养基的配制

1．培养基的配制原则

(1)目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。

(2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。

(3)pH要适宜：细菌为6.5～7.5，放线菌为7.5～8.5，真菌为5.0～6.0，培养不同微生物所需pH不同。

(4)认清不同生物需要的营养物质不同

①微生物需要的营养成分有水、无机盐、碳源、氮源，有些微生物还需要特殊营养物质，如生长因子。

②在人和动物中，营养物质包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类。

③在植物中，营养物质包括矿质元素、水、二氧化碳三类。

2．培养基的成分

3．培养基的分类

特别提醒

几种微生物的营养和能量来源

二、无菌技术

1.目的：获得纯净的微生物培养物。

2.关键：防止杂菌污染。

3.两种无菌技术的比较

比较项目条件结果常用方法应用范围

消毒较为温和的仅杀死物体表面煮沸消毒法日常用品

物理、化学或内部一部分微

巴氏消毒法不耐高温的液体

方法生物

操作空间、操作者的衣物

化学药物消毒法

和手等

接种室、接种箱或超净工

紫外线消毒法

作台

杀死物体内外所湿热灭菌法培养基、容器等

强烈的理化

灭菌有的微生物，包括干热灭菌法玻璃器皿、金属用具等

方法

芽孢和孢子灼烧灭菌法接种工具等

特别提醒：

1.消毒和灭菌后避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触；

2.消毒和灭菌的实验操作都应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行。

三、培养基的制备

1.培养基制备的步骤：

计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。

归纳总结

四、纯化培养的两种接种方法

项目平板划线法稀释涂布平板法

接种操作在接种的固体培养基表面连续划线一系列的梯度稀释后进行涂布平板

注意事项每次划线前后均需灼烧接种环稀释度要足够高，为确保实验成功可以增加稀释度

的范围

菌体获取在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑从适宜稀释度的平板上