体外标记免疫分析.pptVIP

输入标题标准品、质控品输入标题输入标题输入标题分离技术2特异性抗体示踪剂(标记品)143基本试剂和基本技术化学结构:应与待测物具有相同的化学结构化学纯度：高度纯化化学度量：准确稳定性：不易变质、不易降解标准品高滴度02可长期保存04亲和力大01特异性强03特异性抗体高比活度生物活性与免疫活性与标记前一致化学纯度95%稳定性好：标记品不易脱落示踪剂（标记品）结合部分与游离部分尽可能完全分开非特异性结合率（NSB%）低，小于5%分离的成分便于测量分离效果不受外界环境影响分离试剂操作简便、价廉易得分离技术---要求微孔滤膜法盐析法活性炭吸附法磁化颗粒法双抗体法固相分离法分离方法第三节体外标记免疫分析的类型体外标记免疫分析的类型体外标记免疫分析放射性核素标记免疫分析(RIA、IRMA)01酶标记免疫分析02时间分辩荧光免疫分析03发光标记免疫分析(化学发光标记免疫分析化学发光酶免疫分析电化学发光免疫分析)04概念：1一种将放射性核素测量的高灵敏性、高精确性和抗原抗体反应的高特异性相结合的体外测定超微量（10-9～10-15g）物质的新技术。2放射性核素标记免疫分析放射性核素标记免疫分析放射性核素标记竞争性(标记抗原,抗体限量)RIA分类:非竞争性(标记抗体,抗体过量)IRMA优缺点：自1959年Yalow和Berson创建的放射免疫分析（RIA）具有灵敏度高、特异性强、简便实用、成本低廉等优点。为生物医学的微量物质分析开创了新的领域。发展到目前为止由此衍生出了各种各样的标记免疫分析技术。虽然RIA仍有较广泛的使用市场和价值，但其方法学上固有的弱点使发展受到一定限制。如必须使用放射性同位素作为标记物，存在人为的因素影响较大、辐射防护及防止污染的问题，试剂盒使用时间短，可测量范围相对较窄，难以实现操作及测量的自动化等。0102放射性核素标记免疫分析是应用酶标记抗体（抗原）与抗原（抗体）产生特异性反应，根据酶对底物的显色反应而定量分析待测抗原或抗体含量。概念：均相EIA：酶增强免疫分析（EMIT）非均相EIA:酶联免疫吸附分析法（ELASA）分类:酶标记免疫分析（EIA）时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)概念：是应用镧系元素标记抗原或抗体，利用紫外线或激光使其发射荧光，结合波长和时间两种分辨技术的微量分析方法。常用镧系元素：铕、铽、钐、镝特点：分析范围宽灵敏度高专一度高稳定性强1234发光标记免疫分析分类化学发光标记免疫分析（CLIA）电化学发光免疫分析(ECLIA)化学发光酶免疫分析(CLEIA)化学发光标记免疫分析（CLIA）化学发光免疫技术：化学发光分析是根据化学反应产生的辐射光的强度来确定物质含量的分析方法。化学发光免疫分析是将化学发光系统与免疫反应相结合，用化学发光相关的物质标记抗体或抗原，与待测的抗原或抗体反应后，经过分离游离态的化学发光标记物，加入化学发光系统的其它相关物产生化学发光，进行抗原或抗体的定量或定性检测。---夹心法发光YYY磁微粒被测抗原+抗体+带吖啶酯标记物抗体YYYYYYYYYYY冲洗后（1）加入H2O2（pH10）（2）加入碱（pH10）化学发光标记免疫分析（CLIA）概念：利用化学反应中释放大量自由能产生激发态中间体，当其退激到基态时，发射出光子，对这些光子量进行测量从而进行定量分析抗原含量。常用发光剂：鲁米诺类、吖啶酯类特点：灵敏度高特异性强重复性好测定范围宽1234化学发光酶免疫分析(CLEIA)是将高特异性的酶标记免疫分析技术和具有高灵敏度的化学发光分析技术相结合的一种标记免疫分析方法。发光剂：金刚烷特点：标记结合稳定发光持续时间长有利于测定123发展RIA标记抗原(*Ag)和非标记原(Ag)与限量抗体(Ab)竟争结合。分类核医学核医学第六章体外标记免疫分析体内诊断：脏器显像功能测定诊断体外诊断：放射分析临床核医学治疗：131I治疗甲亢核医学实验核医学：利用核技术探索生命现象的本质和物质变化规律体外标记在核医学中的地位体外标记免疫分析体外标记免疫分析是一门综合性学科，也是一门边缘学科。是集基础医学、实验医学及临床应用于一体的学科。在当前的各种免疫诊断技术中，标记免疫分析是最活跃、发展最快的一个领域。体外标记免疫分析概念：是利用放射分析方法或其派生的相关非放射分析技术