2025年骨髓细胞形态学检查标准操作程序.pdfVIP

博学之，审问之，慎思之，明辨之，笃行之。——《礼记》

骨髓细胞形态学检查标准操作程序

1.检验目的

借以了解造血功能，常用以确诊、协助诊断、鉴别诊断血液病和其他疾病。

2.检验原理

通过对骨髓细胞涂片进行瑞氏-姬姆萨染色后，计算一定数量的细胞，观察其骨髓与血液

中各种细胞数量和质量的变化，借以了解造血功能。通过血细胞化学染色是在观察形态基础

上进一步了解细胞化学成分，对血细胞各种生化成分及代谢产物作定性、定位和定量的观察。

3.标本

新鲜外周血、骨髓

4.试剂

瑞氏-姬姆萨A液

瑞氏-姬姆萨B液

5.环境与安全

5.1环境要求

环境温度要求：18~30℃（最佳温度：25℃）。

环境相对湿度要求：20%~70%。

操作台应放置在通风良好、灰尘少的地方，尽量平稳坚固，避免晃动，仪器附近无强电

磁干扰、无剧烈震动、无腐蚀性气体。

5.2人员安全

工作中所有与病人的样本接触或有潜在性接触可能的样本都视为污染物。在操作时有必

要穿戴保护性的工作服、外套和手套。

在处理废弃样本时不可触摸废弃物，一定戴手套和穿工作服以避免直接接触。如果操作

人员不小心接触血液、试剂、废弃物，皮肤或衣物上沾到了样本、试剂及废液，用大量清水

冲洗并适当考虑必要的医疗措施。

6.操作步骤

6.1骨髓取材

6.1.1骨髓穿刺部位：一般取胸骨、棘突、髂骨前嵴或后嵴等部位。两岁以内小儿主张

用胫骨穿刺。穿刺部位不同，取材可能有明显差异。如再生障碍性贫血的患者进行不同部位

骨穿，可发现不同的细胞增生程度，以胸骨穿刺最好，棘突次之，髂骨最差。故必要时应多

勿以恶小而为之，勿以善小而不为。——刘备

部位取材，以便能全面地了解骨髓情况。

6.1.2吸骨髓液：一般不超过0.2ml，否则易于稀释。

6.1.3骨髓取材满意的几项指标：抽吸骨髓时，患者有特殊酸痛感，骨髓液中应含有骨

髓小粒。显微镜下观察涂片，可发现骨髓特有细胞，如巨细胞、浆细胞、网状细胞、组织嗜

碱细胞、幼稚红细胞、幼稚粒细胞。

6.2涂片检查

6.2.1涂片制备：要求涂片均匀，有头、体、尾三部分，血膜面积约1.5cm*3cm，厚度

以透过血膜可看清字迹为限。选择骨髓小粒部分制作涂片，骨髓液量不宜过多。此外，因为

骨髓液中纤维蛋白含量高，凝固较快，所以涂片过程要快。骨髓不可用草酸盐抗凝，否则会

使血细胞核变形，核染色质致密，胞浆空泡形成，出现草酸盐结晶。

6.2.2涂片检查时考虑到一般体积大的细胞分布于涂片的上下边缘及尾部，计数时应从

体尾交界处开始迂回向尾部移动。

6.3染色

6.3.1染色：本实验室所用的染色方法为瑞氏-姬姆萨染色法，其具体步骤如下：

A：在已干燥的血涂片的两侧用蜡笔各画一条线，以防染色液流出血涂片的范围外。

B:加瑞氏-姬姆萨染色试剂A液(约0.5~0.8ml)于涂片上，并让染液覆盖整个标本涂片染

色1分钟后。

C:再将瑞氏-姬姆萨染色试剂B液滴加于A液上面(滴加之量为A液的2~3倍)。以洗耳

球吹出微风，使液面产生涟漪状，让两液充分混合，染色10~15分钟。

D:水洗、干燥、镜检。

6.4骨髓涂片观察

首先在低倍镜下全面观察成熟红细胞与有核细胞的大致比例，以确定增生程度。国内一

般分为5级，判断标准如下：

增生极度活跃：成熟红细胞与有核细胞之比约为1:1，见于白血病、红白血病。

增生明显活跃：成熟红细胞与有核细胞之比约为10:1，见于白血病、增生性贫血。

增生活跃：成熟红细胞与有核细胞之比约为20：1，见于正常骨髓象和某些贫血。

增生减低：成熟红细胞与有核细胞之比约为50：1，见于造血功能低下时。

增生严重减低：成熟红细胞与有核细胞之比约为300：1，见于典型的再生障碍性贫血

6.4.1粒、