2025年液相色谱流动相的注意事项.pdfVIP

穷则独善其身，达则兼善天下。——《孟子》

色谱分析中不可缺少的，它可以是气体、液体、也可

以超临界流体等。常见的流动相主要有：乙腈-水溶液、

乙腈-醋酸水溶液、甲醇-水溶液、乙腈-磷酸水溶液等。

流动相溶剂的选择

1.所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固

定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱过

程的稳定性和重复性的要求。

2.溶剂应当不干扰检测器的工作，溶剂应与检测器匹

配，选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无

吸收的流动相。

3.在制备分离中,溶剂应当易于除去,不干扰对分离组分

的回收。

4.溶剂的粘度要小，保证合适的柱压降。

5.从实用角度考虑，溶剂应当价格低廉，容易购得，使

用安全，纯度要高。

秘诀1由强到弱：

一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，

这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机

溶剂(乙腈或甲醇)的比例。

秘诀2三倍规则：

每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留因子约增加

3倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整

的过程中，注意观察各个峰的分离情况。

以铜为镜，可以正衣冠；以古为镜，可以知兴替；以人为镜，可以明得失。——《旧唐书·魏征列传》

3粗调转微调：

当分离达到一定程度，应将有机溶剂10%的改变量调整为

5%，并据此规则逐渐降低调整率，直至各组分的分离情况不

再改变。

流动相的配制要点要记得

1.配制不含水的有机溶剂类流动相所用量筒应区分开，必须

是干燥的，不得有水。

2.流动相的抽滤。含水流动相和不含水流动相的抽滤装置应

区分开。抽滤不含水的有机溶剂类流动相所用装置必须是干

燥的，不得有水。

3.超声波震荡，除气泡。

4.使用0.04%的叠氮钠溶液以防止流动相长菌。

流动相的储存及标识

将适量抽滤好的流动相倒入流动相专用储液瓶，润洗一次后

倒入废液瓶，再将剩余流动相全部倒入专用储液瓶；填写

《流动相标签》，并将标签贴在储液瓶上。更换流动相时应

及时更新《流动相标签》。

流动相效期

流动相类别效期

纯甲醇3个月

纯乙腈1个月

5%的甲醇/乙腈水溶液15天

缓冲盐溶液3天

纯化水1天

君子忧道不忧贫。——孔丘

7天

乙腈与缓冲盐混合溶液7天

例如：纯甲醇使用日期是2015年06