微生物的实验室培养(课件).ppt

用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基(约10~

20mL)倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。倒平板技术等待平板冷却凝固，大约需5~10min。然后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上。倒平板技术倒平板技术问题讨论培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。0102问题讨论01为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？02答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。平板冷凝后，为什么要将平板倒置？答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。微生物的接种技术：05接种方法有：03平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作,将聚集的菌钟逐步稀释分散到培养基的表面.01平板划线法和稀释涂布平板法04在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落.02（二）纯化大肠杆菌平板划线的操作方法?交叉划线法?连续划线法平板划线的操作一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。细菌的菌落特征因种而异菌落碳源功能C素构成细胞及代谢产物的骨架C素是大多数微生物代谢所需的能量来源自养微生物以二氧化碳或碳酸盐为惟一碳源进行代谢生长；异养微生物必须以有机物作为碳源进行代谢生长。碳源是异养微生物的主要能源物质。无机C源：CO2、碳酸盐，只能被自养微生物利用有机C源：各种糖类，其次是有机酸、醇类、脂类和烃类化合物碳源种类Cncnc-micro凡是能为微生物提供所需氮元素的营养物质都称为氮源。氮源(nitroginsource)Cncnc-micro为微生物提供合成细胞物质代谢产物的原料对许多微生物来说，既可利用无机态氮，也可利用有机态氮。?固氮微生物可以利用氮气作为氮源进行生长。某些种类的氮源也能为微生物提供能量，如NH3既是硝化细菌的氮源又是能源，含C、H、O、N的蛋白质等也能为微生物提供能量。氮源功能Cncnc-micro分子态氮：固氮微生物以分子氮为唯一氮源无机态氮：硝酸盐、铵盐几乎所有微生物能利用有机态氮：蛋白质及其降解产物a实验室常用牛肉膏、蛋白胨、酵母膏做氮源b生产用玉米浆、豆饼、葵花饼、花生饼等氮源种类Cncnc-micro构成微生物细胞的组成成分调解微生物细胞的渗透压，PH值和氧化还原电位有些无机盐如S、Fe还可做为自养微生物的能源构成酶活性基的组成成分，维持酶活性。Mg、Ca、K是多种酶的激活剂无机盐（mineralsalts）无机盐功能Cncnc-micro构成微生物细胞以C、H、O、N、P、S六种元素为主，约占细胞干重的95％以上；Ca、K、Mg、Fe为大量元素，以无机盐阳离子形式被吸收，配培养基要加磷酸盐、硫酸盐。Zn、Ca、Mn、Co、Mo等微量元素，在微生物培养中有0.1PPM就可以了，自来水原料中已够用，不需另加。无机盐种类Cncnc-micro微生物生长不可缺少的微量有机物质叫生长因子。维生素氨基酸碱基Cncnc-micro生长因子有的微生物自己不能合成维生素，需要外加，主要是B族维生素、硫胺素、叶酸、泛酸、核黄素等，如生产味精需加生物素（是B族中的一种即VH）。维生素Cncnc-micro有些微生物自己不能合成某种氨基酸，必须给予补充，如赖AA发酵所用的黄色短杆菌不能合成环丝AA，为环丝AA缺陷型菌株，在培养基中必须添加含环丝AA的氮源。如豆饼水解液或