实验二各种生物装片的制备.pptVIP

实验二、各种生物装片的制作找同学讲解生物绘图的要求并让学生初步掌握生物绘图的基本方法。学会指导学生制作其装片找同学边讲解边演示各种生物装片的制作过程熟练掌握各种生物装片的制作。目的与要求二.材料和用具

AHB及2H或3H绘图铅笔、橡皮、直尺、绘图纸、铅笔刀、载玻片，盖玻片、土豆、B洋葱、显微镜。三.实验步骤0102生物绘图找同学讲解生物绘图的要求和方法要求1.具有高度的科学性，不得有科学性错误。形态结构要准确，比例要正确，要求真实感，立体感，精美而美观。2.图面要力求整洁，铅笔要保持尖锐，尽量少用橡皮。3.绘图大小要适宜，位置略偏左，右边留着注图。4.绘图的线条要光滑、匀称，点点要大小一致。5.绘图要完善，字体用正楷，大小要均匀，不能潦草。注图线用直尺画出，间隔要均匀，且一般多向右边引出，图注部分接近时可用折线，但注图线之间不能交叉，图注要尽量排列整齐。6.绘图完成后在绘图纸上方要写明实验名称、班级、姓名、时间，在图的下方注明图名及放大倍数。生物绘图的方法有多种，最长见的是点点衬阴法。点点衬阴法即将图形画出后，用铅笔点出圆点，以表示明暗和深浅，给予立体感。在暗处点要密，明处要疏，但要求点要均匀，点点要从明处点起，一行行交互着点，物体上的斑纹描出再点点衬阴，点点衬阴法要求不能用涂抹阴影的方法以代替点点，此点初学者要尤为注意。徒手切片法（同学讲解并演示）用光学显微镜观察的样品必须是透明的薄片，因此，要先把观察的材料制成透明的切片后，才能在显微镜下观察。徒手切片方法是观察植物内部构造的方法，徒手切片的重要工具是双面刀片，每次用后必须擦干净，注意保护，以免生锈。徒手切片的过程如下：材料的选择:一般选用软硬适度的植物根，茎或叶等，材料不宜太硬也不太软。切较软的材料时，可用马铃薯、胡萝卜根或肥皂将欲切的材料夹住；一起进行切片。有些叶片亦可卷成筒状再进行切片。欲切之材料应先截成适当的段块，并削平切面，一般截面的大小以不超过3-5mm2为宜，长度2-3cm，较便于手持并进行切片。2、方法和步骤：切片前，在小培养皿中盛以清水，准备好毛笔，滴管和刀片等用具和欲切的材料。切片时用左手的三个指头拿住材料，并使材料稍突出在手指上，以免刀口损伤手指。右手持双面刀片，把刀刃放在经过削平的平面上，轻轻压住它，刀口向内，且与材料断面平行，然后以均匀的力量和平稳的动作，自左前方向右后方滑行切片，注意要用整个手臂向后拉（手腕不必用力）。切片时动作要敏捷，材料要一次切下（整个过程中应用清水湿润材料和刀面，使之润滑，否则材料容易破损）。如此连续动作，切下许多薄片后，就用湿毛笔将这些薄片轻轻移入已盛水的培养皿中备用。徒手切片时最重要的是切下一小片平而薄的组织，而并不要求切下一个完整的切片。用毛笔挑选最薄而透明的切片，取出放在载玻片上，制成临时装片观察；如标本有保留价值，则可再进行以下处理，制成永久标本。将切片移入小烧杯中，经50％、60％、70％各级乙醇中进行脱水及固定，每级5分钟，然后移入1％番红染液中（用70％乙醇溶液配制）中30分钟。01继续移入80％、90％、95％各级乙醇脱水，每级5分钟。再移入1％固绿染液（用95％乙醇配制）染色30分钟，再入95％乙醇中洗去浮色，最后进入无水乙醇脱水5分钟。02切片置于无水乙醇:二甲苯＝1：1的溶液中5分钟，再移入纯二甲苯中5分钟，此时组织切片呈透明状态。03将切片置于载玻片中央，加一滴树胶，盖上盖玻片封片，待干燥后即可使用。04徒手制片（徒手切片）一般指徒手用刀片（常用单面刀片）把新鲜的植物材料切成薄片的制片方法。此法在植物制片中具有十分重要的地位，是一种普遍应用的制片方法。比如在研究花芽分化、新梢、新根及叶片等解剖构造以及贮藏营养等方面时，常采用徒手切片法。此外，在进行植物组织显微化学鉴定以及制作永久制片之前，也经常先用徒手切片进行观察，以检查材料是否合乎要求而决定取舍。因此徒手制片技术是科研人员必须学习和掌握的基本技术之一。徒手制片的主要优点是：（1）能及时观察研究植物生活组织的结构和天然色彩；（2）方法及用具简单，不需切片机等机械设备，短时间即可完成，这是其他方法所不及的；主要缺点是（3）对于微小、柔软、水分过多以及坚硬的材料，难以用徒手切成薄片；（4）对于操作不熟练者，往往切成厚薄不匀或不完整的切片。徒手制片的应用和主要特点徒手制片的方法和注意事项徒手制片最主要的工具就是刀片，常可用单面保安刀片。要获得良好的切片，首先要保持刀口的锋利，因此在进行材料的截取、削平切面时，可以用解剖刀或用过的刀片，不要用新刀，以免钝化刀口。切片前，先准备好一个培养皿盛好清水，同时准备好显微镜、载玻片、盖玻片、刀片等用具，然后拿