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2025年小动物成像仪实验报告.pdfVIP

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臣心一片磁针石,不指南方不肯休。——文天祥

小动物成像仪实验报告

根据目前的统计结果,由于进入临床研究的药物中大部分因为安

全问题而终止,导致了在临床研究中大量的资金浪费,而分子成像技

术的问世,为解决这一难题提供了广阔的空间,将使药物在临床前研

究中通过利用分子成像的方法,获得更详细的分子或基因述水平的数

据,这是用传统的方法无法了解的领域,所以分子成像将对新药研究

的模式带来革命性变革。其次,在转基因动物、动物基因打靶或制药

研究过程中,分子成像能对动物的性状进行跟踪检测,对表型进行直

接观测和(定量)分析;分子成像技术主要分为光学成像、核素成像、

磁共振成像和超声成像、CT成像。

光学成像

活体动物体内光学成像(OpticalinvivoImaging)主要采用生

物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术。生

物发光是用荧光素酶基因标记细胞或DNA,而荧光技术则采用荧光报

告基团(GFP、RFP,及dyes等)进行标记。利用一套非常灵敏的光

学检测仪器,让研究人员能够直接监控活体生物体内的细胞活动和基

因行为。

通过这个系统,可以观测活体动物体内肿瘤的生长及转移、感染

性疾病发展过程、特定基因的表达等生物学过程。传统的动物实验方

法需要在不同的时间点宰杀实验动物以获得数据,得到多个时间点

的实验结果。相比之下,可见光体内成像通过对同一组实验对象在不

同时间点进行记录,跟踪同一观察目标(标记细胞及基因)的移动及

以铜为镜,可以正衣冠;以古为镜,可以知兴替;以人为镜,可以明得失。——《旧唐书·魏征列传》

变化,所得的数据更加真实可信。另外,这一技术对肿瘤微小转移灶

的检测灵敏度极高,不涉及放射性物质和方法,非常安全。因其操

作极其简单、所得结果直观、灵敏度高等特点,在刚刚发展起来的几

年时间内,已广泛应用于生命科学、医学研究及药物开发等方面。

基因、细胞和活体动物都可被荧光素酶基因标记。标记细胞的方

法基本上是通过分子生物学克隆技术,将荧光素酶的基因插到预期

观察的细胞的染色体内,通过单克隆细胞技术的筛选,培养出能稳定

表达荧光素酶的细胞株。目前,常用的细胞株基本上都已标记好,市

场上已有销售。将标记好的细胞注入小鼠体内后,观测前需要注射

荧光素酶的底物—荧光素,为约280道尔顿的小分子。荧光素脂溶性

非常好,很容易透过血脑屏障。注射一次荧光素能保持小鼠体内荧光

素酶标记的细胞发光30-45分钟。每次荧光素酶催化反应只产生一个

光子,这是肉眼无法观察到的,应用一个高度灵敏的制冷CCD相机及

特别设计的成像暗箱和成像软件,可观测并记录到这些光子。

光在哺乳动物组织内传播时会被散射和吸收,光子遇到细胞膜和

细胞质时会发生折射现象,而且不同类型的细胞和组织吸收光子的特

性并不一样。在偏红光区域,大量的光可以穿过组织和皮肤而被检测

到。利用灵敏的活体成像系统最少可以看到皮下的500个细胞,当然,

由于发光源在老鼠体内深度的不同可看到的最少细胞数是不同的。在

相同的深度情况下,检测到的发光强度和细胞的数量具有非常好的

线性关系。可见光体内成像技术的基本原理在于光可以穿透实验动物

的组织并且可由仪器量化检测到的光强度,同时反映出细胞的数量。

以铜为镜,可以正衣冠;以古为镜,可以知兴替;以人为镜,可以明得失。——《旧唐书·魏征列传》

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