实验三血糖测定.ppt

血糖浓度测定目的要求掌握邻甲苯胺法测定血糖的原理和方法血液中所含的葡萄糖，称为血糖。它是糖在体内的运输形式。目前国内医院多采用葡萄糖氧化酶法和邻甲苯胺法测定血糖。前者特异性强、价廉、方法简单,其正常值：空腹全血为3.6～5.3毫摩尔/升（65～95毫克/分升），血浆为3.9～6.1毫摩尔/升。后者由于血中绝大部分非糖物质及抗凝剂中的氧化物同时被沉淀下来，因而不易出现假性过高或过低,结果较可靠,其正常值：空腹全血为3.3～5.6毫摩尔/升（60～100毫克/分升），血浆为3.9～6.4毫摩尔/升（70～115毫克/分升）。基本原理本实验采用邻甲苯胺法测定血糖。其原理是葡萄糖在酸性介质中加热脱水反应生成5－羟甲基－2－呋喃甲醛，分子中的醛基与邻甲苯胺缩合成青色（蓝绿色）的薛夫氏碱，通过比色可以定量。CH2OH（CHOH）4CHOHOH2C──CHOO+3H2OH+△HOH2C──CHOONH2CH3+HOH2C──CH=ONCH3葡萄糖羟甲基糠醛邻甲苯胺Schiff碱操作方法血糖浓度测定标准曲线的制作取干燥试管7支，编号后，按下表顺序加入试剂管号12345测定空白标准葡萄糖液(ml)0.250.51.01.52.0／／血清（ml）／／／／／0.05／蒸馏水(ml)1.751.51.00.5／1.952.0邻甲苯胺试剂(ml)5.05.05.05.05.05.05.0A630试剂加毕，混匀，于沸水浴中煮沸10min取下，流水冷却，在630nm波长下，以空白管调零，测定各管的A值，并作好记录。标准葡萄糖应用液浓度为：5.56mmol/L即1mg/mlPARTONE结果处理1、标准曲线的绘制（以1~5管绘制标准曲线）×××××0.020.040.060.080.10（x，y）mg0.10.40.30.20.5计算结果（1）从标准曲线上读取测定管的血糖浓度，并求出1L血清中葡萄糖的含量。（2）选取一管光密度与测定管接近的标准管计算1L血清中葡萄糖的含量。结果与标准曲线上查找的结果进行比较。心怀梦想路致远方HAVEADREAMANDTRAVELFAR邻苯甲胺法测定血糖具有操作简单,特异性较高的优点,试剂成本也较低,。但该法一般在浓酸高温条件下发生反应,因此在做血糖测定时须多加注意。注意事项