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吾日三省乎吾身。为人谋而不忠乎?与朋友交而不信乎?传不习乎?——《论语》
基因工程名词解释和问答
基因工程复习试题
(名词解释和问答仅供参考)
名词解释:
1、基因工程(geneticengineering):就是在分子水平上,提取(或
合成)不同生物的遗传物质(基因),在体外切割,再和一定的载体拼接
重组,然后把重组的DNA分子引入细胞或生物体内,使这种外源
DNA(基因)在受体细胞中进行复制与表达,按人们的需要繁殖扩增基
因或生产不同的产物或定向地创造生物的新性状,并能稳定地遗传给
下代。2、载体(vector):基因工程中,携带目的基因进入宿主细胞进行
扩增和表达的工具。3、限制性核酸内切酶(restriction
endonuclease):定义:是一类能识别双链DNA分子中的特定核苷酸序
列,并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。主要从原核生物中分
离纯化出来。
4、1)同裂酶(isoschizomers):来源不同,识别位点和切割位点均
相同的限制性内切酶。即同裂酶产生同样的切割,形成同样的末端。
同裂酶对识别序列的甲基化状态有不同的限制性反应。2)同尾酶
(isocaudamer):来源不同,识别序列也不相同,但切出的DNA片段具
有相同的末端序列。3)同位酶:识别序列相同,但切割位点不同。
5、酶活性单位:1个酶活性单位就是指1min能转化1mmol底物
的酶量。6、DNA连接酶:能催化双链DNA片段靠在一起的3′羟基末
端和5′端磷酸基团末端之间形成的磷酸二酯键,使两末端连接的一种
核酸酶。
7、DNA聚合酶:作用是指在引物和模板的存在下,把脱氧核糖核
苷酸(dNTP)连续地加到引物链的3’–OH末端,催化核苷酸的聚合作
用。
8、DNA连接酶能够封闭双螺旋DNA骨架上的缺口,但不能封闭
裂口。缺口(nick):即在双链DNA的某一条链上两个相邻核苷酸之间失
去一个磷酸二酯键所出现的单链断裂;9、常用连接酶:E.coliDNA连接
子曰:“知者不惑,仁者不忧,勇者不惧。”——《论语》
酶、T4DNA连接酶(常用)。既能进行粘性末端的连接,又能进行平
末端的连接,但E.coliDNA连接酶进行平末端连接的效率低。10、
DNA连接酶的连接条件:必须是两条双链DNA、一条链的3‘末端有
游离的羟基(-OH),而另一条链的5’端具有一个磷酸基团(-P)、需要
能量(ATP或NAD+)。11、T4多核苷酸激酶:是一种磷酸化酶,可将
ATP的磷酸基团转移到DNA或RNA的5‘末端。1)5‘加磷酸基团。
对于缺乏5‘磷酸的DNA或合成接头进行磷酸化。2)末端标记。12、
末端转移酶TDT来源:小牛胸腺活性:不依赖模板的DNA聚合酶,能
催化dNTP掺入DNA3′-OH末端。当反应液中只有一种脱氧核苷酸
时,可形成仅有一种核苷酸组成的3′尾巴,称之为同聚物加尾。功
能:1)主要用于给外源DNA片段及载体分子加上互补的同聚物尾巴,便
于连接。2)末端标记
13、碱性磷酸酶:细菌碱性磷酸酶(bacterialalkaline
phosphatase,简称BAP)、小牛肠
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