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非淡泊无以明志,非宁静无以致远。——诸葛亮
河南农业大学考研专业课《现代分子生物
学》
课程试卷(含答案)
__________学年第___学期考试类型:(闭卷)考试
考试时间:90分钟年级专业_____________
学号_____________姓名_____________
1、分析题(5分,每题5分)
1.现要求以某一植物或动物组织cDNA为模板扩增A基因,并构建
该基因的重组表达质粒pET28aA,并在大肠杆菌BL21中进行表达。[宁
波大学2019研]
答案:(1)从组织中提取RNA的步骤如下:
①将组织工作在液氮中磨碎,每50~100mg组织加入1ml
TRIzol裂解液溶解样品,充分吹打混匀。
②每1mlTRIzol加入2.0ml氯仿,剧烈震荡15s,室温放置
5min。
③4℃,10000g离心15min,此时RNA主要包括集中在水相中。
④将磷酸氢二钠转移至新的离心管中,加入等体积气相反应,室
温放置10min。
⑤4℃,10000g离心10min,此时可在离心管底部这时观察到
百学须先立志。——朱熹
白色沉淀,即为RNA。
⑥用75冷的乙醇洗涤沉淀,4℃,7500g以下,离心5min,弃
上清。
⑦超净台中吹干,加入无RNase的水溶解。
(2)检测RNA质量的方法如下:
①凝胶成像:取适量RNA溶液加入电泳缓冲液后才,跑琼脂糖凝
胶电泳,如果28S和18S条带明亮、清晰,并且28S的亮度在18S
条带的两倍以上,则认为RNA的质量是好的。
②吸光度检测:重复使用紫外分光光度计检测RNA样品在
260nm、280nm处的吸光度,若两者的比值在1.8~2.0时,可认为
RNA纯度良好,蛋白质等其他生物体的污染可以接受。
解析:
2、判断题(55分,每题5分)
1.RNA连接酶的底物是RNA,DNA连接酶的底物是DNA。()
答案:错误
解析:RNA连接酶可特异性地将DNA或RNA的预腺苷酰化5′端连
接到RNA3′端,T4DNA连接酶作用底物是双链的DNA分子或
RNADNA杂交分子。
2.肿瘤通常是抑癌基因和原癌基因两者都突变后才发生的()。
老当益壮,宁移白首之心;穷且益坚,不坠青云之志。——唐·王勃
答案:正确
解析:恶性肿瘤的形成往往涉及多个基因的,与原癌基因、突变抑癌
基因突变的逐渐积累有关。肿瘤的发生归根到底是因为原癌基因的激
活和抑癌基因的功能丧失,往往涉及多个基因的改变。
3.运用噬菌体或动物病毒作为载体转化细胞的过程称为转移。
()
答案:错误
解析:运用噬菌体或动物病毒作为载体转化细胞的过程称为转染。
4.在克隆载体pBSK质粒中,利用完整的lacZ基因作为筛选标记,
白色转化菌落表明重组质粒含有插入片段。()
答案:错误
解析:在
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