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第12讲光合作用的原理和影响因素及应用
主要考点必备知识考点一绿叶中色素的提取和分离、光合场所考点二探索光合作用原理的部分实验和光合作用的过程
考点一绿叶中色素的提取和分离、光合场所
白化苗由于不能形成叶绿素,无法进行光合作用,待种子中贮存的养分耗尽就会死亡。可见,叶片中的色素与光能的捕获有关。绿叶中有哪些色素呢?玉米(白化苗)玉米(正常苗)
一、实验原理1.提取原理2.分离原理无水乙醇可以用体积分数95%的乙醇加入适量无水碳酸钠来替代或丙酮。色素能够溶解在有机溶剂中(如无水乙醇)中,而不溶于水。用提取色素。用分离色素。层析液绿叶中的色素在层析液中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸条上扩散得快;反之则慢。这样,绿叶中色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分开。纸层析法分离的方法:
新鲜的绿叶(如菠菜的绿叶:色素含量高)、干燥的定性滤纸、研钵、无水乙醇、层析液、二氧化硅、碳酸钙等。二、材料用具
1.提取绿叶中的色素2.分离色素3.观察与记录(1)制备滤纸条(2)画滤液细线(3)分离绿叶中的色素三、方法步骤
12①称取5g的绿叶,剪碎,放入研钵中。②放入少许二氧化硅和碳酸钙,再放入10mL无水乙醇,迅速、充分地研磨。SiO2CaCO3无水乙醇讯速充分作用作用作用作用作用防止乙醇挥发有助于研磨充分防止色素被破坏溶解、提取色素叶绿体能够被充分破坏,使得色素能充分被释放出来1.提取绿叶中的色素三、方法步骤
1234③将研磨液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤。④将滤液收集到试管中,及时用棉塞将试管口塞严。用单层尼龙布过滤,过滤叶脉及二氧化硅等并且不吸附色素。(滤纸、纱布会吸收色素)盛放滤液的试管用橡胶塞塞紧,防止无水乙醇的挥发和色素氧化。1.提取绿叶中的色素三、方法步骤
(1)制备滤纸条为什么要剪去两角?避免边缘效应使层析液扩散均匀,同时到达滤液细线,防止两侧色素扩散快,色素带不整齐三、方法步骤2.分离色素——纸层析法将干燥的定性滤纸剪成宽度略小于试管直径、长度略小于试管长度的滤纸条,再将滤纸条一端减去两角,并在距这一端底部1厘米处用铅笔画一条细线。剪两角干燥的铅笔线干燥的定性滤纸其透性好,吸收滤液较多,使层析液在滤纸条上扩散得快
(2)画滤液细线为了积累更多的色素使分离色素带更明显。用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀画一条细线(也可将滤液倒入培养皿,再用盖玻片蘸取滤液,在横线处按压出均匀的细线)。待滤液干后,再重复画一到两次。★注意:细、齐、直,防止色素带重叠而影响分离效果,使分离出的色素带平整不重叠三、方法步骤2.分离色素——纸层析法
纸层析法将适量的层析液倒入试管中,将滤纸条(有滤液细线的一端朝下)轻轻插入(细线不能浸入)层析液中,随后用棉塞塞紧试管口。滤液细线中的色素会被层析液溶解,而不能在滤纸上扩散。也可用小烧杯代替试管,用培养皿盖住小烧杯。(防止层析液挥发,因其易挥发且有毒)三、方法步骤2.分离色素——纸层析法(3)分离色素
三、方法步骤3.观察与记录排序越上面,说明该色素在层析液的溶解度越,扩散速率越,色素带越宽,说明该色素含量越高快多
0.5秒延迟符,无意义,可删除.叶绿素类胡萝卜素(含量约3/4)(含量约1/4)叶绿素a(蓝绿色)叶绿素b(黄绿色)胡萝卜素(橙黄色)叶黄素(黄色)色素含量(色素带宽度):叶绿素a>叶绿素b>叶黄素>胡萝卜素溶解度(扩散速度):胡萝卜素>叶黄素>叶绿素a>叶绿素b距离最远:距离最近:叶黄素和胡萝卜素叶绿素a和叶绿素b胡黄ab向前走三、方法步骤3.观察与记录
胡萝卜素叶黄素叶绿素a叶绿素b色素种类色素含量色素带宽度溶解度扩散速度胡萝卜素叶黄素叶绿素a叶绿素b最窄较窄最宽较宽最少较少最多较多最高较高较低最低最快较快较慢最慢色素的功能:吸收、传递、转化光能色素的颜色是由其反射的光所决定三、方法步骤3.观察与记录
(1)收集到的滤液绿色过浅的原因分析a.未加石英砂(二氧化硅),研磨不充分。b.使用放置数天的菠菜叶,滤液色素(叶绿素)太少。c.一次加入大量的无水乙醇提取浓度太低(正确做法:分次加入少量无水乙醇提取色素)。d.未加碳酸钙或加入过少,色素分子被破坏。1.绿叶中色素提取和分离实验异常现象分析四、实验分析
(4)滤纸条只呈现胡萝卜素、叶黄素色素带:没经干燥处理,滤液线不能达到细、齐、直的要求,使色素扩散不一致造成的。a.忘记画滤液细线。b.滤液细线接触到层析液,且时间较长,色素全部溶解到层析液中。忘记加碳酸钙导致叶绿素被破坏或所用叶片为“黄叶”。(2)滤纸条色素带重叠:(3)滤纸条看不到色
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