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氨基酸纸上层析实验报告
篇一：实验六氨基酸的纸层析法
氨基酸的纸层析法
一．目的
了解并掌握氨基酸纸层析的原理和方法。
二、原理
以滤纸为支持物的层析法，称为纸层析法。纸层析所用
展层剂大多由水和有机溶剂组成。展层时，水为静止相，他
与滤纸纤维亲和力强；有机溶剂为流动相，它与滤纸纤维亲
和力弱。有机溶剂在滤纸上又下向上移动的，称为上行法；
有上向下移动的，称为下行法。将样品在滤纸上确定的原点
处展层，由于样品中各种氨基酸在两相中不断进行分配，且
他们的分离系数各不相同，所以不同的氨基酸随流动相移动
的速率也不相同，于是各种氨基酸在滤纸上就相互分离出来，
形成距原点不等的层析点。
112
太上有立德，其次有立功，其次有立言，虽久不废，此谓不朽。——《左传》
在一定条件下（室温、展层剂的组成、滤纸的质量、ph
值等不变），不同的氨基酸有固定的移动速率（Rf值）Rf=
原点到层析点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离。用混合
氨基酸做样品时，如果只用一种溶剂展层，由于某些氨基酸
的移动速率相同或相近，就不能将它们分开，为此，当用一
种溶剂展层后，可将滤纸旋转90度，以第一次所的层析点
为原点，在用另一溶剂展层，从而达到分离的目的。这种方
法称为双向层析法。
本试验主要介绍的是单向层析法。其中混合氨基酸有精
氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸组成。
三、实验仪器
1、新华滤纸
2、层析缸
3、细线
4、点样管
5、橡皮筋
6、电吹风
7、喷雾器
四、实验试剂
1、混合氨基酸（精氨酸，酪氨酸，苯丙氨酸）
2、展层剂：正丁醇：12%氨水：95%乙醇：蒸馏水=13：
3：3：1（v:v）
212
百学须先立志。——朱熹
3、0.5%茚三酮—无水丙酮溶液：0.5g茚三酮溶于100ml
无水丙酮，贮于棕色瓶中
五、实验步骤
1、取滤纸剪成20×10厘米的滤纸条一张，在一端打孔，
系一根细线，在另一端2~3cm处用铅笔画一横线，中间画一
圆点（原点）。
2、取毛细管一支(回收)，吸取氨基酸混合液，在原点
处点样，样点直径不宜超过5mm,每点一次用吹风机吹干，点
2~3次为佳。
3、点样后将滤纸放入层析缸中展层，注意点样线要高
于层析液面，滤纸不要贴在层析缸璧上，当展层至另一端
1~2cm处时，停止展层（大约2~3小时）。
4、取出滤纸，用铅笔记下溶剂前沿，然后用热风吹干
（或烘箱60℃）烘干。
5、均匀喷上茚三酮—无水丙酮液，注意使溶液不倒流，
不间断。
6、用吹风机吹干，观察层析点，确定其几何中心。
7、量取数值，计算各自的Rf值，与表中标准氨基酸Rf
值比较，确
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