生化药物分析及生物检定技术.pptVIP

进入无菌室的物品、用具，需经高压蒸汽灭菌，不能用高压蒸汽灭菌的，需用消毒液擦拭其外部，由传递窗递入无菌室。洗涤物品、用具。消毒无菌检查的供试品容器外部。5．操作前准备薄膜过滤法过滤按规定量取供试品，按该样品项下规定的方法处理后，对于无菌粉针剂和粉末原料应用稀释剂溶解到至少100mL具塞的瓶中，混匀。用灭菌刻度吸管注入或直接倒入装有孔径≤0.45μm、直径约50mm滤膜的无菌过滤器，抽干，使药液中的微生物截留在滤膜上。冲洗用冲洗液或其他适宜的溶剂冲洗滤膜多次，以洗去抗菌物质。每张滤膜每次冲洗量为100mL，且冲洗量不宜过大。0103026．检查方法6．检查方法(1)薄膜过滤法③接种培养将好氧菌、厌氧菌培养基，真菌培养基及阳性对照用培养基分别加至薄膜过滤器内(封闭式过滤器)；或取出薄膜分成3等份，分别加入好氧菌、厌氧菌培养基，真菌培养基及阳性对照用培养基中，好氧菌、厌氧菌培养基管置30～35℃，真菌培养基管置23～28℃，培养14天，在培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。阳性对照管应根据供试品特性加人相应对照菌液1mL(抗细菌药物加入金黄色葡萄球菌对照菌液，抗厌氧菌药物加入生孢梭菌对照菌液，抗真菌药物加入白色念球菌对照菌液)，阳性对照管细菌应在30～35℃培养48h，真菌应在23～28℃培养72h，有菌生长。直接接种法供试品的制备供试品如为注射液、供角膜穿通伤及手术用的滴眼剂或灭菌溶液，按规定量取供试品，混合。供试品如为注射用无菌冻干品或供直接分装成注射用的无菌粉末原料，按规定量取供试品，加入稀释掖，或该药品项下规定的溶剂用量制成一定浓度的供试品溶液。32146．检查方法壹直接接种法肆供试品如为肠线、缝合线，取最小包装5个，拆开包装，共取11股，接种于足以浸泡没供试品的适量培养基中。叁供试品如为外科敷料，取供试品4个包装，以无菌操作拆开包装，于不同部位分别剪取约100mg或lcm×3cm的供试品11份。贰供试品的制备6．检查方法直接接种法供试品的制备供试品如为灭菌医用器具，依据样品大小、形状的不同，取供试品11个，接种于足以浸没供试品的适量培养基中(或用稀释液各40mL，分别冲洗内壁，收集各种洗液，混合，按薄膜过滤法检查)。供试品如为青霉素类药品，接规定量取供试品，分别加入足够使青霉素灭活的无菌青霉素酶溶液适量，摇匀，混合(亦可按薄膜过滤法检查)。6．检查方法检查方法取上述备好的供试品，以无菌操作将供试品分别接种2mL于6管好氧菌、厌氧菌培养基，其中1管接种金黄色葡萄球菌对照用菌液1mL作阳性对照，另接种于真菌培养基5管。轻轻摇动，使供试品与培养基混合。好氧菌、厌氧菌培养基管置30～35℃，真菌培养基管置23～28℃，培养14天，在培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。阳性对照管在24h应有菌生长。如果在加入供试品后培养基出现浑浊，培养14天后不能从外观上判断有无微生物生长，可取该培养液适量转种在同种新鲜培养基中或斜面培养基上，继续培养，细菌培养2天，真菌培养3天，观察是否再出现浑浊或斜面上有无菌生长，或用接种环蘸取培养液涂片，染色，用显微镜观察是否有菌。01026．检查方法《中国药典》(2005年版)的无菌检查结果判断。在培养期结束后，当阳性对照管显浑浊并确有菌生长，阴性对照管澄清时才可根据观察所得结果判定如下。第一次检查结果供试品的好氧菌、厌氧菌培养基管及真菌培养基管均为澄清或虽显浑浊但经检查证明无菌生长，均判为供试品无菌检查合格。第一次检查结果供试品的好氧菌、厌氧菌培养基管及真菌培养基管中任何一管显浑浊时，取生长管的培养物转种营养琼脂或真菌培养基斜面培养，取菌苔或培养物，经革兰染色、镜检，确证有菌生长，应重新取样进行复试。1237．无菌检验结果判断及报告7．无菌检验结果判断及报告复试时，取同量供试品，依法重试，复试结果除阳性对照管外，其他各管均无菌生长，判供试品检查合格；复试结果其中任一培养基管有菌生长，应判供试品无菌检查不合格。复试时需同时做阴性试验。阴性试验只是不加样品，一切操作与检查样品相同。如果阴性试验培养管中有菌生长表示操作中无菌操作有过失，检验结果无效，并且可以重新复试。01当符合下列至少一个条件时，方可判实验结果无效。02无菌检查试验所用的设备及环境的微生物监控结果不符合无菌检查法的要求。03回顾无菌试验过程，发现有可能引起微生物污染的因素。04阴性对照管有菌生长。05供试品管中生长的微生物经鉴定后，确证是因无菌试验中所使用的物品和(或)无菌操作不当引起的。试验若经确认无效，应重试。7．无菌检验结果判断及报告8．原始记录（详见附录五）。生物