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第一章发酵工程
第二节微生物的培养技术及应用
(一)微生物的基本培养技术
人教版(2019)选择性必修三
学习目标
1.掌握通过配制培养基,了解配制培养基的基本步骤,以及培养基中各类营养物质的配比。(生命观念)
2.通过对培养皿和培养基进行灭菌,了解消毒和灭菌的原理及方法。(科学思维、科学探究)
3.通过对酵母菌进行纯培养,理解并掌握微生物接种、分离和培养的基本原理和过程。(社会责任)
向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细
菌,再经过发酵就可以制成酸奶,由于制作工艺并不
复杂,一些人会在家里自制酸奶,自制酸奶虽然方便
,但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事件屡见不鲜,
主要原因是在制作过程中有杂菌混入。
怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢?
应该先对制作用具和原料进行灭菌处理,再接种纯的菌种,并控制
发酵条件,避免杂菌进入
1.培养基概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养
基质。
2.作用:用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
3.种类:
凝固剂琼脂
液体培养基固体培养基半固体培养基
微生物的分离与鉴定,
活菌计数,保藏菌种
观察微生物的运动、分类鉴定
扩大培养、工业
生产
无有
一、培养基的配制
4.培养基的基本成分
基本成分:
水—水是微生物生长和代谢必不可少的营养物质。
无机盐NaCI、K₂HPO₄、MgSO₄等——调节酸碱平衡、维持渗透压
除上述营养物质外,培养基是否还需要其他物质呢?
提供碳元素的物质
提供氮元素的物质
是微生物合成各有机物所必需的
碳源
氮源
4.培养基的基本成分
基本成分:
碳源、氮源、水、无机盐
还需满足微生物对pH、特殊营
养物质、0₂的需求。
◆特殊营养物质:
维生素、氨基酸、生长因子等
组分
含量
提供的主要营养物质
牛肉膏
5g
碳源、磷酸盐和维生素等
蛋白胨
10g
氮源和维生素等
NaCl
5g
无机盐
H₂O
定容至1000mL
水
乳酸杆菌
培养基中添加维生素
霉菌
培养基pH调至酸性
细菌
培养基pH调至中性或弱碱性
厌氧微生物
提供无氧的条件
表1-1.1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成
注:牛肉膏和蛋白胨来源于动物,含有糖、维生素和
蛋白质等营养物质。
微生物接种操作时为什么
要“全副武装”和在专门
的设备内进行?
获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。
1.无菌技术:在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。
2.方法:
无菌操作过程中,应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。实验操作应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行。
①实验操作的空间、操作者的衣着和手,②培养的器皿、接种用具和培养基等
进行清洁和消毒进行灭菌
3.无菌操作的对象:
(a)Testtuberackwithtubesshomingvaniousdlosures(c)DeLongshakerflaskwithdosurewlaneif(d)
A.Bacteriologicaltube
B.Screwcap
CPlasticdosure
D.Metaldlosure
ENonabsorbentcotton
消毒使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微
62~65℃煮30min或
80~90℃下处理
0.5~1min。可杀死绝大部分微生物,不破坏食物的营养成分。
对接种室、接种箱或超
净工作台用紫外线照射30min,以杀死物体表面或空气中的微生物。
100℃煮沸5~6min。
可杀死微生物的营
养细胞和一部分芽
孢。
用70%酒精擦拭双手、
用氯气消毒水源等。
巴氏消毒法
生物。
二、无菌技术
灭菌用强烈的理化方法杀死物体内外的所有的微生物,包括芽孢和孢子。
湿热灭菌干热灭菌灼烧灭菌
注意:
①使用前必须先把锅内的水加热煮沸,将锅
排尽能达到设的压力和温度。
还能有效避免操作、降到时
者自身被微生物感
染!!接种环灼烧灭菌
无菌技术除了用来防止实验室的培养物皮其他小来微
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